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happywyh

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR

PCR产物跑电泳,没有目的条带,有类似是引物二聚体的条带,什么原因造成的??
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happywyh

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by imyting at 2012-04-11 00:02:36:
可能的原因太多了
1:引物量过多,退火温度较低,造成引物形成二聚体不能与模板结合;
2:退火温度太高,引物不能与模板集合;
3:PCR仪插孔老化,建议换些插孔试试;
4:Taq酶失活、体系不好、模板不对等等; ...

之前有一次用菌落PCR,疑似有目的条带和二聚体形成,之后再做就没有目的带
其他条件是不变的
5楼2012-04-11 10:39:34
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happywyh

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 风逝zhilv at 2012-04-12 00:30:08:
正如楼上各位所说,原因很多,不要盲目重复试验,好好回顾比较一下,找找两次实验的差异,细到每个步骤,尤其是引物的稀释!祝好运!

你说的很有道理~分析可能的错误,在重复试验
这次重提了模板,明显在目的位置有条带生成~割胶回收后又没有条带了,纠结
11楼2012-04-12 15:58:33
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