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happywyh

铁虫 (小有名气)

[求助] PCR

PCR产物跑电泳,没有目的条带,有类似是引物二聚体的条带,什么原因造成的??
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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小丹木木: 金币+3, 太正确了,PCR不成功的因素是多方面的 2012-04-11 08:26:11
可能的原因太多了
1:引物量过多,退火温度较低,造成引物形成二聚体不能与模板结合;
2:退火温度太高,引物不能与模板集合;
3:PCR仪插孔老化,建议换些插孔试试;
4:Taq酶失活、体系不好、模板不对等等;
5:然后就是引物不好
    如果确定这些都不是原因,可再次重复……
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
3楼2012-04-11 00:02:36
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imyting

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

可以把退火温度提高一下看看,或者做个梯度吧……
悠哉游哉做实验,成兮败兮我随便
6楼2012-04-11 12:33:54
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