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cfmzxf84

木虫 (正式写手)

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[求助] 求助，如何用发光法测定酶活Km值

我的酶本身是发光酶，通过加入底物就可以发光了。求教怎么测定底物的Km值，1/v~1/s法中的v怎么确定呢？谢谢

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1楼 2012-04-10 09:16:38

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angler5156

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引用回帖:

4楼: Originally posted by imyting at 2012-04-11 09:08:57
你这只是一个底物浓度，你需要选择至少5个底物浓度，每个底物浓度测三次平行试验；然后做切线（如图，也可直接取前面几个点做线性回归），切线斜率的相反数就是初速度了，有了初速度和底物浓度，后面就不用多说了吧 ...

这个切线如何选定，如何判定都很不明确啊。同酶的浓度，不同底物浓度，如何选择呢。