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我是驴

金虫 (小有名气)

[求助] 求解DNA浓度测量中的一些问题

我提取出来的DNA经紫外分光光度检测，A260/A280＜1.8，按书中说的话应该是没有RNA污染的，可跑琼脂糖电泳后会发现最前端有一团较亮的带，应该是RNA污染，这作何解释？还有就是，在这种情况下(存在RNA污染)，我测得的A260能不能真实反映提取液中DNA的浓度？求虫友解惑答疑哦，
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努力向前
1楼 2012-04-06 22:07:52
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to-be

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
如果分光光度计检测的数值可信的话，同时排除其他DNA污染，跑胶前端较亮的应该是很小的DNA，是提取过程中断裂的小片段。
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生活是面镜子~
2楼2012-04-06 22:32:10
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我是驴

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by to-be at 2012-04-06 22:32:10:
如果分光光度计检测的数值可信的话，同时排除其他DNA污染，跑胶前端较亮的应该是很小的DNA，是提取过程中断裂的小片段。

我将DNA样品保存了两天后重新在跑电泳，我要的基因组DNA仍然存在，而最前端的很亮的那一团几乎没有了，我觉得因该是 RNA，容易降解哈。
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努力向前
3楼2012-04-06 22:48:25
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to-be

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 我是驴 at 2012-04-06 22:48:25:
我将DNA样品保存了两天后重新在跑电泳，我要的基因组DNA仍然存在，而最前端的很亮的那一团几乎没有了，我觉得因该是 RNA，容易降解哈。

DNA 也会降解啊，所以尽量避免反复冻融。只要不影响后期实验，到底是什么也就不重要了。
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生活是面镜子~
4楼2012-04-06 23:02:26
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