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新虫 (正式写手)

[交流] western bloting 短路的疑问 已有5人参与

大家好:
  关于western blotting,我所查到技术资料总是提醒短路问题.但是常常给出“滤纸、胶、膜之间的大小,一般是滤纸>=膜>=胶。”,我的疑问是,滤纸直接接触不是已经短路了么?
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012006006211

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我也有类似的疑问,不过我们在做western blotting 的时候一般胶,膜,滤纸都是差不多大的,主要是防止局部短路造成温度过高,用恒流过夜的办法可以避免短路的发生,如果不赶时间的话用恒流比较好,恒压的话接上电源以后要观测电流是否过高,过高的话应该重新放膜和胶
2楼2012-04-05 12:05:28
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在长在的man

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
不晓得啊,不过加油,,顶一下
3楼2012-04-05 12:32:39
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Rubisco580

金虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
western转膜的时候就是个短路的电路,所以才需要冰来降温,防止过热。
我做的时候滤纸剪的很大,和做三明治的夹子一样大,膜略大于胶。这样可以一次转膜好几个。但是发热量很厉害。
4楼2012-04-05 16:34:29
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新虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Rubisco580 at 2012-04-05 16:34:29:
western转膜的时候就是个短路的电路,所以才需要冰来降温,防止过热。
我做的时候滤纸剪的很大,和做三明治的夹子一样大,膜略大于胶。这样可以一次转膜好几个。但是发热量很厉害。

这个还真没具体想过
5楼2012-04-05 17:03:05
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zxc6884

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
正负极都是在同一个溶液里的,主要是保证胶转膜上的电流均一,防止侧漏哦。好像没说滤纸一定要大于膜和胶吧。一般要求滤纸比该面胶或膜小一点吧。
关注我关注的
6楼2012-04-05 21:15:42
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telomerase

至尊木虫 (著名写手)

cain


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
滤纸>=膜>=胶
这样会短路的,=就好了,>不保险
我的路靠我的脚踩出来!!!不走寻常路!!!
7楼2012-04-05 22:14:26
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新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by zxc6884 at 2012-04-05 21:15:42:
正负极都是在同一个溶液里的,主要是保证胶转膜上的电流均一,防止侧漏哦。好像没说滤纸一定要大于膜和胶吧。一般要求滤纸比该面胶或膜小一点吧。

我也是这么想的。很难保证膜 、胶、滤纸一样大小,取其次的做法,个认为是滤纸<胶<膜,都是稍小于
8楼2012-04-06 12:14:34
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