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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 基线出现有规律的正弦峰,如图所示,求解 已有19人参与

用的是Gilson的液相,用乙腈-0.1%TFA水(15:85)跑基线时,出现如图所示的正弦峰,而换用同样比例的乙腈-纯水,甲醇-纯水及纯甲醇时,基线很平稳。另外不跑流动相,直接跑基线时,基线也很平稳。请问乙腈-0.1%TFA水产生正弦基线峰是什么原因?(说明:波长=220nm)

[ Last edited by a83875785 on 2012-4-6 at 13:17 ]
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

没有人么?
2楼2012-04-04 21:39:58
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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4楼: Originally posted by guoheizi at 2012-04-04 23:44:52:
横坐标为3 那这个吸收峰蛮大的啊 220处乙腈是不是也有一定的吸收?

乙腈的截至波长是210nm,220nm影响不大。
5楼2012-04-05 00:12:01
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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3楼: Originally posted by xiaoxiao270 at 2012-04-04 22:11:13:
可能是你柱子里有脏东西,被乙腈冲出来了

没有脏东西,我确定,会不会是其他原因
6楼2012-04-05 00:12:23
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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14楼: Originally posted by cdccd at 2012-04-06 12:47:39:
很可能是两个柱塞泵中的一个故障,使得流速即为"正弦形状"。

lz解决了请来说一下啊

好的,一定回复,但现在正在解决Ing....
15楼2012-04-06 13:18:17
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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13楼: Originally posted by fayfeifei at 2012-04-06 11:42:31:
气泡,乙腈超声除下气试试。

好像不是乙腈原因,只要我用含0.1%TFA水-乙腈15:85跑基线时,一定会有锯齿峰(正弦峰),但用纯水-乙腈就没有这种情况,同样是220nm,TFA用微孔滤膜过滤了,还是不行。是什么原因呢?
16楼2012-04-06 13:45:47
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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11楼: Originally posted by 马兰花- at 2012-04-06 11:13:32:
应该是乙腈的问题,我也遇到过。

好像不是乙腈原因,只要我用含0.1%TFA水-乙腈15:85跑基线时,一定会有锯齿峰(正弦峰),但用纯水-乙腈就没有这种情况,同样是220nm,TFA用微孔滤膜过滤了,还是不行。是什么原因呢?
17楼2012-04-06 13:46:02
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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8楼: Originally posted by xuexinyyh at 2012-04-05 08:25:48:
是溶剂的问题,我遇到过这种情况,换乙腈,然后充分超声。

好像不是乙腈原因,只要我用含0.1%TFA水-乙腈15:85跑基线时,一定会有锯齿峰(正弦峰),但用纯水-乙腈就没有这种情况,同样是220nm,TFA用微孔滤膜过滤了,还是不行。是什么原因呢? 柱压一直是正常
18楼2012-04-06 13:46:37
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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20楼: Originally posted by dacailiao at 2012-04-06 20:36:54:
有可能是TFA的问题。
上次做个药物含量的时候,波长是210nm,原来是1L中加了1ml的甲酸,因为分离度不太好,试着用乙酸、50mM醋酸铵缓冲液做了下,基线根本就平不了。
看到工作站里面显示的紫外灯能量,样品池已 ...

这个Gilson液相不熟,而且实验室就我懂操作液相,我也不知道怎么看紫外灯能量。汗...
21楼2012-04-06 22:57:31
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a83875785

铁杆木虫 (著名写手)

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25楼: Originally posted by yulingzhu at 2012-04-07 19:16:03:
这可能有两种原因,一是在220nm波长下,乙腈-TFA流相的背景吸收比较大,你可以试着在高波长下走下基线,如果基线变平稳了就是这个原因,若还是没改变的话,你再调整下乙腈和TFA的比例,有可能在你的那个配比下两者 ...

换成280nm了,基线平稳了,但灵敏度较220nm下下降了5倍。为什么220nm下,乙腈-TFA背景吸收大呢?而乙腈-水却在220nm下没有问题呢?
27楼2012-04-08 20:55:54
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