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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何用DEPC水配试剂？
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fc3110813

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何用DEPC水配试剂？

最近做RNA实验，但不知道DEPC水如何配置溶液，我需要配置Tris, EDTA, NaCl,有的溶液甚至有甘油，NP40。所以想问DEPC水配溶剂，是将DEPC加入溶剂中搅拌过夜，再高温蒸发。还是将DEPC处理过的水去配溶剂？求各位大侠援助。
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1楼 2012-03-31 17:02:28
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装子516

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC,在搅拌器上搅拌至完全溶解，即看不到“油珠”为止，用来处理枪头、EP管的DEPC水不需高压灭活，而用于配制DEPC酒精等试剂和用来这种RNA相关试验的DEPC水需灭活后使用。
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2楼2012-03-31 17:15:19
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+5, 鼓励发帖提供有帮助的信息！ 2012-03-31 18:35:13
嗯......................
配DEPC处理溶液，是按你的所说的有两种。
需注意的是：Tris是不能与DEPC同存的，因为某基团（我忘了是啥了）会与DEPC反应，从而降低DEPC有效浓度，所以要用DEPC处理过的水配置
其他用DEPC去处理都行，NP40，甘油我不太了解，你可以查查的。
祝实验顺利，若有说错希望高手指点
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Let God do with it as He wills
3楼2012-03-31 17:26:59
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fc3110813

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-03-31 17:26:59:
嗯......................
配DEPC处理溶液，是按你的所说的有两种。
需注意的是：Tris是不能与DEPC同存的，因为某基团（我忘了是啥了）会与DEPC反应，从而降低DEPC有效浓度，所以要用DEPC处理过的水配置
其他用 ...

也就是说先将溶液用DEPC水处理，再将DEPC高温蒸发，对吗？
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4楼2012-03-31 18:56:22
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bbwalkman

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在试剂公司买的DEPC水是经过DEPC处理过的，用于RNA实验，你既然做RNA实验当然是要保证所有东西都是洁净的，一般我配Buffer的时候都是用在试剂公司买的DEPC处理过的水，而且DEPC这个东西是有毒的，所有还是小心点吧，你要怎么用是根据你试验操作的。。。看看是不是必须用DEPC处理你溶液里面所有的东西
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5楼2012-03-31 19:24:26
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atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
引用回帖:
4楼: Originally posted by fc3110813 at 2012-03-31 18:56:22:
也就是说先将溶液用DEPC水处理，再将DEPC高温蒸发，对吗？

......................
不能是叫DEPC水处理吧..............这样会起歧义的
是用DEPC处理
而高温也不是让DEPC蒸发的........那样岂不是挥发成毒性气体了？
是降解了...
嘿嘿，除毛求疵？
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Let God do with it as He wills
6楼2012-04-01 00:15:06
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microk

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by atlanticwi at 2012-04-01 00:15:06:
......................
不能是叫DEPC水处理吧..............这样会起歧义的
是用DEPC处理
而高温也不是让DEPC蒸发的........那样岂不是挥发成毒性气体了？
是降解了...
嘿嘿，除毛求疵？

高温会让depc分解成别的物质。所以不会有毒性气体出来
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7楼2012-04-01 11:28:07
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fc3110813

银虫 (初入文坛)
fc3110813: 回帖置顶 2012-04-01 14:32:32
引用回帖:
7楼: Originally posted by microk at 2012-04-01 11:28:07:
高温会让depc分解成别的物质。所以不会有毒性气体出来

还想再问下，那如果配TRIS怎么配？如果称量TRIS引入灰尘怎么办？灰尘中也有RNA解旋酶。
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8楼2012-04-01 11:46:40
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fc3110813

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by microk at 2012-04-01 11:28:07:
高温会让depc分解成别的物质。所以不会有毒性气体出来

TRIS配置问题，希望各位大侠有经验的教教，
那如果配TRIS怎么配？如果称量TRIS引入灰尘怎么办？灰尘中也有RNA解旋酶。
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9楼2012-04-01 15:24:53
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