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毕赤酵母基因重组时遇到困难了
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香蕉宝宝
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[交流]
毕赤酵母基因重组时遇到困难了
目的基因大概800bp左右,同源臂设置了大概300bp,一直做电转化,两个多月了,长了N多假阳性,怎么办呢,急死了~~~~~~~~~各位对于做基因敲除有啥好的建议不!
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1楼
2012-03-27 16:47:35
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Petter_JDW
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4楼
:
Originally posted by
香蕉宝宝
at 2012-03-28 12:10:18:
但是目的基因前后的非编码区太短,我看来一下,最多同源臂只能是500bp
那就只有尽量设计长一些~~祝顺利
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5楼
2012-03-28 12:41:11
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Petter_JDW
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★ ★ ★
香蕉宝宝(金币+1): 谢谢参与
rainwander: 金币+2, 鼓励交流
2012-03-28 08:13:59
同源臂太短了~至少也要600 700~太短了假阳性多~~我们做丝状真菌 上下游同源臂在最少1500~~
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2楼
2012-03-27 20:39:57
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★
香蕉宝宝(金币+1): 谢谢参与
同意楼上,我协助学姐做的基因敲除,也存在这个问题来着,然后经老师指点,解决方法与楼上类似。
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3楼
2012-03-27 23:15:56
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香蕉宝宝
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2楼
:
Originally posted by
Petter_JDW
at 2012-03-27 20:39:57:
同源臂太短了~至少也要600 700~太短了假阳性多~~我们做丝状真菌 上下游同源臂在最少1500~~
但是目的基因前后的非编码区太短,我看来一下,最多同源臂只能是500bp
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4楼
2012-03-28 12:10:18
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