[交流] 由于中途有点事情，转化感受态细胞在哪一步可以停一停啊？

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1楼2012-03-25 13:02:25

cgspider

木虫 (正式写手)

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转化的过程中，时间和温度都很重要，一点儿都不得停。。

6楼2012-03-27 10:44:22

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atlanticwi

金虫 (正式写手)

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西瓜: 金币+2, 鼓励~今天很活跃啊 2012-03-25 16:21:28

嗯.......
这个，感受态制好后，可以在冰水混合物上放置较长时间，一旦开始转化，除了转化完后可以冷却时间有所调整，到菌复苏、涂板各步骤，真想不起哪部可以停较长时间了.........所以我觉得一旦开始做最好就不要停了

2楼2012-03-25 13:49:08

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
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西瓜: 金币+2, 斑斑百忙之中来帮忙啊~ 2012-03-25 16:22:07

如是转化质粒，问题不大，实在不行就混混热激下稍稍咬下直接图了，要不冰着，连接产物就不太好停了。

制备感受态，以前中间没停过，但我觉得冰浴那几部多放放应该问题不大，仅供参考。

3楼2012-03-25 13:57:58

aoaoshch

木虫 (小有名气)

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小丹木木: 金币+2, 很认同 2012-03-27 11:39:21

停一下，可能效率就降低了。最好别停啊。
从-70度拿出感受态CELL，冰上待融，5分钟。
加你的片段，混匀，冰浴10～30分钟。
42度热激1分钟，冰浴1分钟，加培养基孵育40～60分钟。
涂板，5分钟。
你看看能否抽出时间……

做实验最好不要忙其他的，一会就忘了到哪一步了。

4楼2012-03-26 22:11:33