[交流] 由于中途有点事情，转化感受态细胞在哪一步可以停一停啊？

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有297人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

刚制备的Sb2S3纳米形貌，大家看看，这叫什么好，下步性能表征做什么好已经有10人回复
帮忙算一个投料比不是很复杂就一个步骤帮帮忙已经有6人回复
目的片段和T1载体连接后转入感受态细胞涂板子总不长菌…… 已经有7人回复
如何将.tif格式转化成.dm3格式已经有9人回复
【求助/交流】革兰氏阳性菌的感受态细胞制备和转化已经有9人回复
【求助】有关单体转化率的问题已经有14人回复
【求助/交流】感受态细胞如何处理已经有16人回复

» 抢金币啦！回帖就可以得到:
查看全部散金贴

1楼2012-03-25 13:02:25

aoaoshch

木虫 (小有名气)

应助: 18 (小学生)
金币: 2646.2
帖子: 153
在线: 105小时
虫号: 800123

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小丹木木: 金币+2, 很认同 2012-03-27 11:39:21

停一下，可能效率就降低了。最好别停啊。
从-70度拿出感受态CELL，冰上待融，5分钟。
加你的片段，混匀，冰浴10～30分钟。
42度热激1分钟，冰浴1分钟，加培养基孵育40～60分钟。
涂板，5分钟。
你看看能否抽出时间……

做实验最好不要忙其他的，一会就忘了到哪一步了。

4楼2012-03-26 22:11:33

查看全部 8 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

MolEPI: 25
应助: 138 (高中生)
金币: 141.2
帖子: 536
在线: 313.2小时
虫号: 1099992

★ ★ ★
805085868(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 鼓励~今天很活跃啊 2012-03-25 16:21:28

嗯.......
这个，感受态制好后，可以在冰水混合物上放置较长时间，一旦开始转化，除了转化完后可以冷却时间有所调整，到菌复苏、涂板各步骤，真想不起哪部可以停较长时间了.........所以我觉得一旦开始做最好就不要停了

2楼2012-03-25 13:49:08

telomerase

至尊木虫 (著名写手)

★ ★ ★
805085868(金币+1): 谢谢参与
西瓜: 金币+2, 斑斑百忙之中来帮忙啊~ 2012-03-25 16:22:07

如是转化质粒，问题不大，实在不行就混混热激下稍稍咬下直接图了，要不冰着，连接产物就不太好停了。

制备感受态，以前中间没停过，但我觉得冰浴那几部多放放应该问题不大，仅供参考。

3楼2012-03-25 13:57:58

良民123

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 1.5
帖子: 3
在线: 57分钟
虫号: 1718796

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

孵育的时候可以降低转速，就可以稍微孵育长一些时间

5楼2012-03-26 22:43:56