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luba

新虫 (小有名气)

[求助] 重组的载体转到菌里再提质粒就变成这样了,也不知道能用不

载体是pCDNA3(5400bp),插入了一个830多的基因,加起来应该6200bp左右,转到JM109里,再提质粒,上方有很亮很粗一条带,不知道是什么。
一共三组,第一组(从左向右)是用的pET21b(5443bp)做的载体,同样的插入基因。后两组都是pCDNA3。Maker用的是lamda HindIII,第一至三条带分别为23130bp,9416bp,4361bp。所以我觉得我的重组质粒大小也不太对,跑的稍微往上了点。但是测序结果是对的。当时挑的单克隆也PCR鉴定过,也是有插入基因条带的。不知道这亮带到底是什么,为什么用pET载体就没有。很担心会影响后续试验,哪位大侠帮我分析分析。
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
质粒条带上方的不规则条带可能是提质粒过程中混入的基因组DNA或者蛋白质之类的杂质
4楼2012-03-23 09:46:42
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