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反相C18柱分离多巴胺，柱子用一段时间后出现分离峰，怎么解决
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我用的安捷伦反相C18的柱子，250mm，分离多巴胺，流动相是水相：有机相=7:3，水相为NaH2PO4 50mmol/L, EDTA 250mg/L, 十二烷基硫酸钠 500mg/L; 有机相为乙腈 200ml/L, 甲醇 100ml/L. 磷酸调pH2.9, 流速1.0ml/min. 柱子是旧柱子，前几次用是好好的，所有的峰型都很好，但是用一段时间后出现分裂峰，双峰，同时检测两个物质，都出现了双峰。刚开始以为是柱子没有接好，造成了死体积，但是把柱子反复接了好几次，还是出现肩峰，分裂峰，只是峰型有了一点变化，这该怎么解决呢，求高人指点!!!  |
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