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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

[求助] 反相C18柱分离多巴胺,柱子用一段时间后出现分离峰,怎么解决

我用的安捷伦反相C18的柱子,250mm,分离多巴胺,流动相是水相:有机相=7:3,水相为NaH2PO4  50mmol/L, EDTA  250mg/L, 十二烷基硫酸钠 500mg/L; 有机相为乙腈 200ml/L, 甲醇 100ml/L. 磷酸调pH2.9, 流速1.0ml/min. 柱子是旧柱子,前几次用是好好的,所有的峰型都很好,但是用一段时间后出现分裂峰,双峰,同时检测两个物质,都出现了双峰。刚开始以为是柱子没有接好,造成了死体积,但是把柱子反复接了好几次,还是出现肩峰,分裂峰,只是峰型有了一点变化,这该怎么解决呢,求高人指点!!!



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爱雪飘飘

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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将色谱柱子反冲,这样可以将堵塞的东西冲掉,如果还不行,把柱头拆下来超声,但是要注意不要让硅胶洒了。
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8楼2012-03-16 20:48:01
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