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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

[求助] 反相C18柱分离多巴胺,柱子用一段时间后出现分离峰,怎么解决

我用的安捷伦反相C18的柱子,250mm,分离多巴胺,流动相是水相:有机相=7:3,水相为NaH2PO4  50mmol/L, EDTA  250mg/L, 十二烷基硫酸钠 500mg/L; 有机相为乙腈 200ml/L, 甲醇 100ml/L. 磷酸调pH2.9, 流速1.0ml/min. 柱子是旧柱子,前几次用是好好的,所有的峰型都很好,但是用一段时间后出现分裂峰,双峰,同时检测两个物质,都出现了双峰。刚开始以为是柱子没有接好,造成了死体积,但是把柱子反复接了好几次,还是出现肩峰,分裂峰,只是峰型有了一点变化,这该怎么解决呢,求高人指点!!!



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zhrmghgmn

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo: 金币+1, 感谢应助,欢迎常来~ ^^ 2012-03-16 19:55:32
可能的原因:
1、色谱柱或保护柱入口部分堵塞。
2、色谱柱或保护柱被污染。
3、色谱柱有塌陷、性能下降。
4、样品未完全溶解或在流动相中析出,最好用流动相溶解样品。
4楼2012-03-16 08:14:06
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
检查一下塔板数吧,柱效应该已经不行了。更换吧。
守候在风中的宁静。
2楼2012-03-15 21:51:34
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落叶沙沙

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-03-15 21:51:34:
检查一下塔板数吧,柱效应该已经不行了。更换吧。

没有别的办法了么?
3楼2012-03-15 22:10:00
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


soundhorizo: 金币+1, 欢迎常来呀 ^^ 2012-03-16 19:56:31
引用回帖:
3楼: Originally posted by 落叶沙沙 at 2012-03-15 22:10:00:
没有别的办法了么?

柱效不行的话,基本没指望了。可以试试再生。乙腈:水5::9——四氢呋喃——乙腈:水5:95。约30倍的柱体积。
守候在风中的宁静。
5楼2012-03-16 08:17:40
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