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monkey514

至尊木虫 (知名作家)

多重人格的虫子

[求助] 黄酮和三萜苷共存如何分离纯化

本人最近有一样品,是乙酸乙酯层的东西,初步检验发现里面有黄酮和三萜的糖苷类化合物,现在想先过一下大孔树脂,按照水洗、30%乙醇洗、50%乙醇洗、75%乙醇洗、95%冲柱的梯度富集一下,之后再怎么做呢?是过一下聚酰胺还是直接上凝胶?还有大孔树脂的型号该怎么选择啊?求高手赐教
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
monkey514: 金币+10, ★★★很有帮助, 呵呵,好,多给你点,我钱也不多啊,多谢了,常来捧场 2012-03-15 12:05:42
monkey514: 回帖置顶 2012-03-15 12:05:51
monkey514: 金币+10, ★★★很有帮助, 再给你10个吧,以后还有很多问题要请教你,我以前做的小分子全忘了,现在就记得怎么做多糖寡糖了 2012-03-15 12:07:01
monkey514: 金币+10, ★★★★★最佳答案, 再给你补充10个吧 2012-03-16 11:14:17
黄酮暂时可以确定有,但是LB反应呈阳性不一定是皂苷,你在仔细看看天然药化教材。LB显色反应有两个顺序,代表两类不同物质。我反正是没记住。
硅胶死吸附大,其实是个先入为主的印象。啥填料死吸附都不小。
梯度问题,这个得由薄层板定。
PS:楼主,你敢不敢多给我点金币啊,上次你做的预实验,一大堆问题,为了给你解决,我打字打得好辛苦,你悬赏了100金币,只给了我5个,这次才给俩。我码那么多字容易吗?
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
4楼2012-03-15 11:50:53
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
monkey514: 金币+2, 有帮助, 谢谢,请帮忙继续解答我的问题哦 2012-03-15 11:02:52
豆哥: 金币+1, 谢谢参与交流 2012-03-15 11:25:36
1.我倒是想知道你是怎么确定既有黄酮苷,又有三萜皂苷的。
2. 该怎么分就怎么分。不过你怕样品跑丢了,就不停的对每一个馏分点板,这时你要做的是,至少两种以上显色剂,浓硫酸乙醇,香草醛浓硫酸,三氯化铁等等。
3.乙酸乙酯层上大孔树脂没必要。摸个合适的薄层条件,先跑根硅胶柱,冲下来的馏分,在考虑是否直接上凝胶。
最后,我还是那个疑惑,你是不是乙酸乙酯萃取的次数太多了,导致皂苷跑到这个层里了?
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
2楼2012-03-15 10:47:13
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栀子7389

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
monkey514: 金币+5, ★★★很有帮助, 嗯,正在考虑AB8和D101这两种呢,就是说在冲的时候梯度走小一点是吧? 2012-03-15 16:34:07
建议大孔用AB-8,30%和40%都冲一下,富集得到黄酮苷和三萜皂苷后,可以用凝胶和反相来分
5楼2012-03-15 16:31:50
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普通回帖

monkey514

至尊木虫 (知名作家)

多重人格的虫子

引用回帖:
2楼: Originally posted by 鸭绿江畔 at 2012-03-15 10:47:13:
1.我倒是想知道你是怎么确定既有黄酮苷,又有三萜皂苷的。
2. 该怎么分就怎么分。不过你怕样品跑丢了,就不停的对每一个馏分点板,这时你要做的是,至少两种以上显色剂,浓硫酸乙醇,香草醛浓硫酸,三氯化铁等等 ...

盐酸镁粉反应溶液都血红色了,然后磷钼酸阳性非常明显,Molish反应,LB反应全阳性,我的结论是正确的吧?用硅胶分会不会死吸附非常多啊?乙酸乙酯萃取次数过多的话应该也是少数皂苷进来了,不应该有那么显著的显色效果吧?硅胶的话你的意思是一个梯度洗脱?走氯仿-甲醇体系按照100:2、100:4、100:6、100:8、10:1、8:1、6:1、4:1、2:1梯度洗脱这样怎么样呢?
所谓男朋友:比自己高12公分,能公主抱,无论是不是高富帅都疼你、舍得在你身上花钱,有上进心,能讨好你妈、超越你爸,经得起诱惑不轻易被妹子拐跑,看你哪儿.
3楼2012-03-15 11:02:22
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baiboxie

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
monkey514: 金币+2, 有帮助, 嗯,这个倒是不用担心,实验室有不少这个填料 2012-03-16 09:59:17
monkey514: 金币+3, 有帮助, 再补三个,呵呵 2012-03-16 11:13:06
乙酸乙酯层有黄酮苷和三萜皂苷?好吧,假如有的话,用凝胶最好了,直接可以把这两类成分分开。效果很好,就是LH-20比较贵。
我盯着新化合物的图谱,就像色狼发现了美女一样!!!
6楼2012-03-16 09:53:21
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anyluk

主管区长 (文坛精英)

国家高级公共营养师

优秀区长优秀版主优秀版主

楼主,像这种给你解答问题的,打字打这么多的,本来就很辛苦,给他20个BB都不为过滴,,
精益求精
7楼2012-03-16 10:21:00
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fjamigo

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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monkey514: 金币+10, ★★★很有帮助, 嗯嗯,现在就觉得这两个型号的挺好,正在考虑用 2012-03-16 11:13:52
黄酮很适合用AB-8,我现在分离正丁醇相的皂苷用D101这个比较好用,不同的型号效果也不一样。聚酰胺和凝胶都可以试试,不麻烦的,加油
8楼2012-03-16 10:21:06
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monkey514

至尊木虫 (知名作家)

多重人格的虫子

引用回帖:
7楼: Originally posted by anyluk at 2012-03-16 10:21:00:
楼主,像这种给你解答问题的,打字打这么多的,本来就很辛苦,给他20个BB都不为过滴,,

OK,加大回馈力度!
所谓男朋友:比自己高12公分,能公主抱,无论是不是高富帅都疼你、舍得在你身上花钱,有上进心,能讨好你妈、超越你爸,经得起诱惑不轻易被妹子拐跑,看你哪儿.
9楼2012-03-16 11:15:03
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盼盼盘盘

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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monkey514: 金币+5, 有帮助, 移动的紫外灯老板不会给买的,呵呵,谢谢 2012-03-16 14:10:47
还是先跑薄层,确定一下用什么展开剂比较好。量多的话考虑用硅胶柱,量少的话建议用LH-20,在加一个移动的紫外灯随时监测黄酮位置
10楼2012-03-16 13:59:41
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