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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 放线菌液体培养基
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maomao1426

木虫 (著名写手)

[求助] 放线菌液体培养基

想要获得大量放线菌细胞，请问用什么培养基较好？

附：现在我用的高氏一号液培，长得不好。
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1楼 2012-03-08 09:13:34
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lgs1

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
不知道你的放线菌是不是链霉菌，我一般用的液体和固体培养基是ISP1和ISP2，具体配方
ISP1：胰酪蛋白胨   5.0g/l
        酵母浸粉      3.0g/l
ISP2：酵母浸粉     4.0g/l
         麦芽浸粉     10.0g/l
        葡萄糖        4.0g/l
         琼脂         20.0g/l
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3楼2012-03-08 10:12:42
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
针对不同类型的放线菌，要用不同的培养基，高氏一号只是其中简单的一种，建议您再把培养基做一下优化，或查看相关文献再进行改进。
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希望大家多多交流。
2楼2012-03-08 09:33:25
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yanglong0321

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
放线菌要对培养基进行优化才能长得比较好。除了高氏一号培养基配方中的无机盐及微量元素不变外，一般要调节碳源和氮源，碳源除了加可溶性淀粉外，还可以适当添加葡萄糖，氮源除了无机氮源外，还要适当添加有机氮源，之前做实验用的是安琪公司的有机氮源酵母浸粉，通过这些优化，效果比原始的高氏一号培养基菌体长得很好。
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4楼2012-03-08 10:26:30
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mada1986

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
maomao1426: 金币+3, ★有帮助 2012-06-20 09:40:46
我这有几个培养基你可以试试看 给你附在下面了 祝实验顺利

MS琼脂培养基（g/L）
甘露醇        20         黄豆粉        20
琼脂粉        20        pH        自然
先将甘露醇溶解于适量水中，再加入到含有相应量琼脂和黄豆粉的三角瓶内，115℃，15min灭菌2次，两次之间振荡瓶子。
微量元素溶液（10×）（mg/100 ml）：
ZnCl2        40        Na2B4O7•10H2O        10
FeCl3•6H2O        200        (NH4)6Mo7O24•4H2O        10
CuCl2•2H2O        10        MnCl2•4H2O        10

高氏１号（G 1）培养基（g/L）：
可溶性淀粉        20        NaCl        0.5
K2HPO4        0.5        KNO3        1.0
MgSO4•7H2O        0.5        FeSO4        0.01
纯化琼脂粉        20        pH        7.4

R2YE培养基（g / L）：
蔗糖        103        K2SO4        0.25
MgCl2•6H2O        10.12        葡萄糖        10
Difco酪蛋白氨基酸        0.1        TES        5.73
微量元素溶液（10×）        2 ml        酵母抽提物        5
称取2.02克纯化琼脂放入250 ml三角瓶中，倒入80 ml上述溶液，塞上棉塞后高压灭菌。使用时，将培养基融化，然后在每瓶中加入以下灭菌溶液：
KH2PO4（0.5%）        1 ml        NaOH（1mol/L）        0.7 ml
CaCl2（5 mol/L）        0.4 ml               
软琼脂培养基：同R2YE培养基，但琼脂粉含量为0.6％。

酵母、麦芽抽提物、葡萄糖（YMB）培养基（g/L）：
酵母抽提物        4        葡萄糖        4
麦芽抽提物        10        微量元素溶液（10×）        200ml
pH        7.2               
YMA培养基：在YMB培养基中加入纯化琼脂2 %
YMA软琼脂培养基：在YMB培养基中加入纯化琼脂0.6 %
YEME液体培养基（g /L）：
酵母抽提物        3        Polypepton        5
麦芽抽提物        3        葡萄糖        10
蔗糖        250        pH        自然

产孢培养基YMS（g/L）
酵母抽提物        1.5        可溶性淀粉        10.0
KNO3        1.0        琼脂粉        16
pH        7.2               

P（原生质体制备）缓冲液（g/L）
蔗糖        103        K2SO4        0.25
MgCl2•6H2O        2.02        微量元素溶液        2 ml
先加水定容至800ml，分装成80 ml的等分样品，然后高压灭菌。
使用前，每瓶加入以下无菌组分：
KH2PO4（0.5%）        1 ml        TES（5.73%，pH 6.5）        10 ml
CaCl2•2H2O（3.68%）        10 ml               
液体培养的时候 不要加琼脂就行了
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5楼2012-03-08 12:13:47
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