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zhymaomao

新虫 (初入文坛)

[求助] SRB法具体操作步骤及所用液体的配制

急求SRB法操作步骤
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zhymaomao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by 豆哥 at 2012-03-08 08:46:31:
药物作用后,去上清培养液,用10%冷TCA固定细胞,4℃放置1h后,用蒸馏水反复洗涤,空气中自然干燥。干燥后加入由冰醋酸配制的SRB(sigma)溶液100μl/孔,室温中染色15min,去上清液,用1%醋酸反复洗涤,空气中 ...

嗯嗯,好的,非常感谢
3楼2012-03-12 12:06:24
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查看全部 7 个回答

豆哥

主管区长 (职业作家)

制粒能手

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
leecius(金币+1): 说得很详细,谢谢。 2012-03-08 08:55:22
药物作用后,去上清培养液,用10%冷TCA固定细胞,4℃放置1h后,用蒸馏水反复洗涤,空气中自然干燥。干燥后加入由冰醋酸配制的SRB(sigma)溶液100μl/孔,室温中染色15min,去上清液,用1%醋酸反复洗涤,空气中自干。最后加入150μl/孔Tris溶液,用酶标仪测各孔的A值。

溶液的配制可以去网上查一下。
SRB溶液最好买SIGMA的。
边学边问,才有学问。
2楼2012-03-08 08:46:31
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yyjy84102

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

SRB法步骤差不多 但是各种试剂的作用时间是需要你自己摸索的(为了实验严谨,最好自己摸索下) 我说下我们实验室的条件吧:药物作用后,取出板,弃去培养液,加入10%冷TCA 200μl固定细胞,4℃放置40min后,用蒸馏水冲洗3遍(注意不要直接冲洗细胞),空气中自然干燥(或37℃培养箱中烘干,但不能太干)。干燥后加入由冰醋酸配制的SRB(sigma)溶液100μl/孔,37℃培养箱中染色30min,去上清液,用蒸馏水冲洗3遍,空气中自干。最后加入150μl/孔Tris溶液,用酶标仪测各孔的A值。
希望对你有帮助吧~~~
4楼2012-05-11 22:20:03
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l-c-l

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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From: Methods in Molecular Medicine, vol. 110: Chemosensitivity: Vol. 1: In Vitro Assays
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5楼2012-05-30 15:08:51
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