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sihuanzhiwei

新虫 (小有名气)

[求助] 环状多肽如何选择流动相

我做的一种环状多肽分子量是一千多,在35度条件下出峰宽有5分钟,不知道在不升高温度的条件下如何通过改变流动相使峰宽变窄。这个分子没有羧基也没有氨基,唯一一个不一样的基团上有个羟基,有个双键,其余都是烷基。

其中一个基团
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chanelxmc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
豆哥(金币+1): 谢谢参与 2012-03-08 08:29:35
sihuanzhiwei(金币+3): 有帮助 2012-03-12 15:24:49
环肽对色谱柱要求很高,要尽量选择好些的,柱长短一些为宜。还有如果流动相里面含酸的话,尽可能酸度高些。还有最好用梯度洗脱。
2楼2012-03-07 09:32:34
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sihuanzhiwei

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by chanelxmc at 2012-03-07 09:32:34:
环肽对色谱柱要求很高,要尽量选择好些的,柱长短一些为宜。还有如果流动相里面含酸的话,尽可能酸度高些。还有最好用梯度洗脱。

流动相就用的甲醇和水,看结构的话,酸碱度对它的影响是不是不大啊
3楼2012-03-07 09:56:36
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sihuanzhiwei

新虫 (小有名气)

我想加盐,改怎么选呢
4楼2012-03-07 10:20:34
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chanelxmc

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-08 20:20:46
我的经验是这种情况还是加酸 峰形好些 加盐的话要试的就比较多了 因为这要看具体情况了。如果甲醇换成乙腈 可能也好些
5楼2012-03-07 10:33:28
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sihuanzhiwei

新虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by chanelxmc at 2012-03-07 10:33:28:
我的经验是这种情况还是加酸 峰形好些 加盐的话要试的就比较多了 因为这要看具体情况了。如果甲醇换成乙腈 可能也好些

可是我做的时候pH=6左右比较好,3.5的时候就不好了
6楼2012-03-07 10:45:58
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-08 20:20:53
sihuanzhiwei(金币+2): 有帮助 2012-03-12 15:32:33
感觉像手性分子啊,百度一下做手性HPLC常用的流动相吧。
7楼2012-03-07 19:28:17
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liuwei10987

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-03-08 20:20:58
sihuanzhiwei(金币+1): 2012-03-12 15:32:46
用流动相溶解样品,浓度高一些,上样量小点,可以做几个浓度的对照实验。
8楼2012-03-07 22:44:45
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sihuanzhiwei

新虫 (小有名气)

我进样20uL,样品用甲醇溶的,浓度100ug/mL,流动相甲醇:水=85:15

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
9楼2012-03-08 19:37:35
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youshan999

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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豆哥(金币+1): 谢谢参与 2012-03-09 10:12:46
sihuanzhiwei(金币+1): 2012-03-12 15:33:14
有些环肽用甲醇做流动相可以,一般都用乙腈,出峰比较好,水是肯定加酸的,千分之0.5-1TFA比较合适。
10楼2012-03-09 09:13:35
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