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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于脱盐柱的问题
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
30楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-11-23 14:54:19
你是提取什么样品的总蛋白质？这个样品具体怎样得来？怎样提取的？...

关于酶的动力学参数计算，请教酶兄一个问题，见贴：
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6655688
望有空过去帮忙解答一下，谢谢！
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31楼2013-11-23 16:00:04
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baicai1487

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
30楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-11-23 14:54:19
你是提取什么样品的总蛋白质？这个样品具体怎样得来？怎样提取的？...

PBS提取，硫酸铵沉淀，再用PBS复溶，透析除盐，G25除小分子，冻干成粉，测冻干粉里的蛋白纯度
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32楼2013-11-25 11:50:34
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
32楼: Originally posted by baicai1487 at 2013-11-25 11:50:34
PBS提取，硫酸铵沉淀，再用PBS复溶，透析除盐，G25除小分子，冻干成粉，测冻干粉里的蛋白纯度...

G25可以同时去除小分子的，包括硫酸铵。硫酸铵是会造成一些蛋白质变性的，在我尝试纯化的10个蛋白质中，就有2个是不耐硫酸铵的。如果你不需要3KD以下的寡肽，你可以超滤提取。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
33楼2013-11-25 18:56:05
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baicai1487

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
33楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-11-25 18:56:05
G25可以同时去除小分子的，包括硫酸铵。硫酸铵是会造成一些蛋白质变性的，在我尝试纯化的10个蛋白质中，就有2个是不耐硫酸铵的。如果你不需要3KD以下的寡肽，你可以超滤提取。...

我现在最担心的就是用G25除小分子会把所有的盐除去，总蛋白中没有缓冲盐会不稳定
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34楼2013-11-28 10:21:42
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
34楼: Originally posted by baicai1487 at 2013-11-28 10:21:42
我现在最担心的就是用G25除小分子会把所有的盐除去，总蛋白中没有缓冲盐会不稳定...

只能是尝试了
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
35楼2013-11-28 13:02:54
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408011126

禁虫 (初入文坛)
本帖内容被屏蔽
36楼2016-12-16 13:52:47
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