24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2100  |  回复: 6

海王之心2751

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE超低分子量电泳实验

我现在在做超低分子量凝胶电泳遇到了这样一个问题,具体如图:左边的1号样和左边的10、11、12号样,跑得很慢,基本上停在那。本图是跑了5h的图,等到左边那三号样跑完要12h以上。做了两次实验都是这样,而且两次都是两边跑不下去。配胶的试剂及配置比例均按厂家给的说明书来配置的。唯一没有按厂家配置的溶液是阴极缓冲液中的Tricine(三羟甲基甘氨酸)换成了甘氨酸,因为我这里没有Tricine.
     请高手指点,是什么原因导致两边跑步下去的?

电泳跑胶图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为梦想努力拼搏!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-04 15:31:25
你图上的是溴酚蓝指示剂,并不是真正蛋白,所以有可能蛋白是跑的好的。最好还是以染色的为准。如果蛋白也没跑好,应该是胶制备时出现了问题吧,看你图上其他的泳道都跑的一致,就边上的慢,有可能是胶的问题。最好重复制备一块胶看看
2楼2012-03-03 17:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good! 2012-03-17 15:17:20
低分子量要用Tricine SDS-PAGE,普通SDS-PAGE小分子都看不到。
3楼2012-03-03 17:23:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
总蛋白量少的泳道可能会跑得慢。要是每次都这样,试着减少跑的慢的用到的进样量。另外看看内槽的缓冲也是不是少了,少了也有可能跑成这样。
4楼2012-03-04 09:54:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要长大

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过像你这样的问题,把凝胶时间加长会好些吧。
祝你好运
5楼2012-03-05 15:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海王之心2751

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-03-03 17:20:12:
你图上的是溴酚蓝指示剂,并不是真正蛋白,所以有可能蛋白是跑的好的。最好还是以染色的为准。如果蛋白也没跑好,应该是胶制备时出现了问题吧,看你图上其他的泳道都跑的一致,就边上的慢,有可能是胶的问题。最好 ...

首先,谢谢你的帮助,跑完后,固定-染色-脱色,结果是蛋白质没有跑好,我自己怀疑是胶有问题。但是奇怪的是浓缩胶和夹层胶不会,和低分子量SDS-PAGE电泳一样,跑的很好,只是到了分离就跑成那样,只是分离胶里要加甘油,但是搅拌加5min超声肯定是充分溶解了呀 !郁闷不知道啥原因。
为梦想努力拼搏!
6楼2012-03-17 14:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海王之心2751

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-03-04 09:54:42:
总蛋白量少的泳道可能会跑得慢。要是每次都这样,试着减少跑的慢的用到的进样量。另外看看内槽的缓冲也是不是少了,少了也有可能跑成这样。

谢谢  缓冲液 没有少 。
为梦想努力拼搏!
7楼2012-03-17 14:54:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海王之心2751 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 312求调剂 +16 gtw1 2026-04-06 18/900 2026-04-07 15:27 by 上岸快快
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +16 额cc 2026-04-06 17/850 2026-04-07 12:45 by rl1980
[考研] 材料科学与工程320求调剂,080500 +8 黄瓜味薯片 2026-04-06 8/400 2026-04-07 11:13 by wangjy2002
[考研] 土木水利专硕276分求调剂 +3 我想上学!!6 2026-04-05 6/300 2026-04-06 18:51 by 我想上学!!6
[考研] 生物与医药求调剂 +7 heguanhua 2026-04-05 8/400 2026-04-06 18:41 by macy2011
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-06 3/150 2026-04-06 15:36 by going home
[考研] 319求调剂 +3 handrui 2026-04-05 3/150 2026-04-06 09:33 by jp9609
[考研] 求调剂 +5 chenxrlkx 2026-04-05 7/350 2026-04-06 07:54 by houyaoxu
[考研] 296求调剂 +3 汪!?! 2026-04-05 5/250 2026-04-05 17:38 by 蓝云思雨
[考研] 考研生物学考A区211,初试322,科目生化和生物综合,求调剂 +6 。。。54 2026-04-03 6/300 2026-04-05 14:54 by JOKER0401
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:24 by 544594351
[考研] 309求调剂 +6 刘刘刘1231 2026-04-02 7/350 2026-04-04 13:41 by liucky
[考研] 一志愿沪985,326分求调剂 +3 刘墨墨 2026-04-03 3/150 2026-04-04 11:16 by 悲伤的芋头
[考研] 297求调剂 +11 ljy20040718! 2026-04-03 13/650 2026-04-04 09:23 by 来看流星雨10
[考研] 282求调剂 +20 ycy1201 2026-04-01 22/1100 2026-04-04 00:42 by userper
[考研] 357求调剂 +13 1050389037 2026-04-03 13/650 2026-04-03 22:27 by 无际的草原
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 315分 085602 求调剂 +15 26考研上岸版26 2026-04-02 15/750 2026-04-03 12:45 by xingguangj
[考研] 262求调剂 +6 励志一定发文章 2026-04-02 7/350 2026-04-03 09:54 by linyelide
[考研] 求调剂 +7 Aniyaio 2026-04-02 7/350 2026-04-02 16:42 by zzsw+
信息提示
请填处理意见