24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2187  |  回复: 6

海王之心2751

金虫 (小有名气)

[求助] SDS-PAGE超低分子量电泳实验

我现在在做超低分子量凝胶电泳遇到了这样一个问题,具体如图:左边的1号样和左边的10、11、12号样,跑得很慢,基本上停在那。本图是跑了5h的图,等到左边那三号样跑完要12h以上。做了两次实验都是这样,而且两次都是两边跑不下去。配胶的试剂及配置比例均按厂家给的说明书来配置的。唯一没有按厂家配置的溶液是阴极缓冲液中的Tricine(三羟甲基甘氨酸)换成了甘氨酸,因为我这里没有Tricine.
     请高手指点,是什么原因导致两边跑步下去的?

电泳跑胶图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为梦想努力拼搏!
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiaxinfish

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助 2012-03-04 15:31:25
你图上的是溴酚蓝指示剂,并不是真正蛋白,所以有可能蛋白是跑的好的。最好还是以染色的为准。如果蛋白也没跑好,应该是胶制备时出现了问题吧,看你图上其他的泳道都跑的一致,就边上的慢,有可能是胶的问题。最好重复制备一块胶看看
2楼2012-03-03 17:20:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜: 金币+1, Good! 2012-03-17 15:17:20
低分子量要用Tricine SDS-PAGE,普通SDS-PAGE小分子都看不到。
3楼2012-03-03 17:23:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子菜鸟

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
总蛋白量少的泳道可能会跑得慢。要是每次都这样,试着减少跑的慢的用到的进样量。另外看看内槽的缓冲也是不是少了,少了也有可能跑成这样。
4楼2012-03-04 09:54:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我要长大

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也遇到过像你这样的问题,把凝胶时间加长会好些吧。
祝你好运
5楼2012-03-05 15:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海王之心2751

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiaxinfish at 2012-03-03 17:20:12:
你图上的是溴酚蓝指示剂,并不是真正蛋白,所以有可能蛋白是跑的好的。最好还是以染色的为准。如果蛋白也没跑好,应该是胶制备时出现了问题吧,看你图上其他的泳道都跑的一致,就边上的慢,有可能是胶的问题。最好 ...

首先,谢谢你的帮助,跑完后,固定-染色-脱色,结果是蛋白质没有跑好,我自己怀疑是胶有问题。但是奇怪的是浓缩胶和夹层胶不会,和低分子量SDS-PAGE电泳一样,跑的很好,只是到了分离就跑成那样,只是分离胶里要加甘油,但是搅拌加5min超声肯定是充分溶解了呀 !郁闷不知道啥原因。
为梦想努力拼搏!
6楼2012-03-17 14:53:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海王之心2751

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 分子菜鸟 at 2012-03-04 09:54:42:
总蛋白量少的泳道可能会跑得慢。要是每次都这样,试着减少跑的慢的用到的进样量。另外看看内槽的缓冲也是不是少了,少了也有可能跑成这样。

谢谢  缓冲液 没有少 。
为梦想努力拼搏!
7楼2012-03-17 14:54:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海王之心2751 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 西安交大新媒学院副院长用撤稿论文结题 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:16 by kudofaye
[教师之家] 论文撤稿了 +3 bjvtcliu 2026-05-24 5/250 2026-05-24 10:06 by Equinoxhua
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +4 zju2000 2026-05-21 5/250 2026-05-24 09:35 by songwz
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 9/450 2026-05-24 08:47 by bjvtcliu
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 hvkbtfonbv 2026-05-23 3/150 2026-05-24 08:01 by 9ps9vgkqva
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 pmo95bazuy 2026-05-23 7/350 2026-05-24 06:35 by fpo5ljpv91
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见