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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 流动相不变，样品浓度不变，溶剂改变，峰面积会改变吗？
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cuckoom

铁虫 (初入文坛)

[求助] 流动相不变，样品浓度不变，溶剂改变，峰面积会改变吗？ 已有1人参与

今天在做一个药物的标准曲线发现，当我用甲醇作溶剂，乙腈-水（0.2%甲酸）作流动相，10mg/l样品的峰面积大概是1万多，而且此时前边的溶剂峰的响应程度比样品峰的响应程度大，而且前边的溶剂峰竟是开叉的倒峰；接着我重新配了一份溶液，改成用乙腈作溶剂，流动相，流速，样品浓度不变，但此时峰面积高达20多万，前边溶剂峰却正常，响应远比样品的响应程度小，也没有开叉的倒峰，样品出峰时间稍微有提着点但变化不是很大；这时我又再重新测了一下之前用甲醇做溶剂的那个样品，这时前面的溶剂峰还是开叉的倒峰，但样品的峰面积却也变成20多万而且数值还比用乙腈作溶剂测得的大些，怎么会出现这些现象呢，我应该选什么作溶剂好呢？我所做的这个样品已指明能溶于甲醇但却没说是否能溶于乙腈。这里请教各位，先谢谢了！
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1楼 2012-02-26 21:08:59
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

xxyao

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 鼓励新虫应助~ 欢迎常来分析版交流 ^^ 2012-02-27 16:01:23
可以明确地答复您，在流动相及样品浓度不变的情况下，溶剂改变，峰面积会改变的。主要原因是溶剂的极性大小会影响被测量物质的紫外吸收强度。
不知您的被测量物质的最佳紫外吸收波长是多少，建议你可以调整紫外吸收波长来避免溶剂峰的影响。
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男孩子害怕黑暗，情有可原；男人害怕光明，罪不可恕。
2楼2012-02-26 21:21:32
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yugijiang

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

这个就是溶剂效应，所以前处理的时候一定要慎重，要根据样品的性质来
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17楼2012-07-06 15:30:31
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普通回帖

痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上正解。不同的溶剂，其紫外吸收强度不同，峰面积不同。建议使用流动相作为溶剂，减少溶剂效应。
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守候在风中的宁静。
3楼2012-02-26 23:35:48
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kaizi0305
4楼2012-02-27 09:34:22
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zzghy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 欢迎常来分析版指导交流 ^^ 2012-02-27 16:01:47
在选好正确的紫外吸收波长后，在波长210或190以下，甲醇乙腈是不会有吸收的，溶剂是不会出峰的。
溶解样品首选流动相
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5楼2012-02-27 12:33:57
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cuckoom

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by xxyao at 2012-02-26 21:21:32:
可以明确地答复您，在流动相及样品浓度不变的情况下，溶剂改变，峰面积会改变的。主要原因是溶剂的极性大小会影响被测量物质的紫外吸收强度。
不知您的被测量物质的最佳紫外吸收波长是多少，建议你可以调整紫外吸 ...

谢谢，我的检测波长是254nm按理说乙腈和甲醇都是没吸收的啊，就算溶剂极性改变也不会改变这么大的峰面积吧
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6楼2012-02-27 12:58:54
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cuckoom

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-26 23:35:48:
楼上正解。不同的溶剂，其紫外吸收强度不同，峰面积不同。建议使用流动相作为溶剂，减少溶剂效应。

我的流动相是乙腈和水（0.2%），你说的流动相是指说乙腈水这个混合物吗，因为我用的乙腈作溶剂也是流动相中的一种啊，不一定是非得要用乙腈水混合物吧，还有这溶剂改变造成峰面积的改变好象也太大了吧
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7楼2012-02-27 13:02:09
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主
引用回帖:
7楼: Originally posted by cuckoom at 2012-02-27 13:02:09:
我的流动相是乙腈和水（0.2%），你说的流动相是指说乙腈水这个混合物吗，因为我用的乙腈作溶剂也是流动相中的一种啊，不一定是非得要用乙腈水混合物吧，还有这溶剂改变造成峰面积的改变好象也太大了吧

是的，流动相是指乙腈-水。最好能够使用流动相溶解，溶剂效应的问题。
溶剂改变，特别是极性溶剂（氢键作用），会对溶质吸收波长、强度可能产生影响。。所以。。。
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守候在风中的宁静。
8楼2012-02-27 13:07:55
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lgmzc818

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
在流动相及样品浓度不变的情况下，溶剂改变，峰面积会改变的。主要原因是溶剂的极性大小会影响被测量物质的紫外吸收强度。
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9楼2012-02-27 13:25:41
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cuckoom

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-27 13:07:55:
是的，流动相是指乙腈-水。最好能够使用流动相溶解，溶剂效应的问题。
溶剂改变，特别是极性溶剂（氢键作用），会对溶质吸收波长、强度可能产生影响。。所以。。。

可为什么当时我测完用乙腈做溶剂的样品后再重新测了一下之前用甲醇做溶剂的那个样品时，样品的峰面积却也变成20多万而且数值还比用乙腈作溶剂测得的大些，是因为测了乙腈作溶剂的样品后，进样针有带入乙腈？可进样针不是每次都会自动清洗的吗？
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10楼2012-02-27 15:32:12
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