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cuckoom

铁虫 (初入文坛)

[求助] 流动相不变,样品浓度不变,溶剂改变,峰面积会改变吗? 已有1人参与

今天在做一个药物的标准曲线发现,当我用甲醇作溶剂,乙腈-水(0.2%甲酸)作流动相,10mg/l样品的峰面积大概是1万多,而且此时前边的溶剂峰的响应程度比样品峰的响应程度大,而且前边的溶剂峰竟是开叉的倒峰;接着我重新配了一份溶液,改成用乙腈作溶剂,流动相,流速,样品浓度不变,但此时峰面积高达20多万,前边溶剂峰却正常,响应远比样品的响应程度小,也没有开叉的倒峰,样品出峰时间稍微有提着点但变化不是很大;这时我又再重新测了一下之前用甲醇做溶剂的那个样品,这时前面的溶剂峰还是开叉的倒峰,但样品的峰面积却也变成20多万而且数值还比用乙腈作溶剂测得的大些,怎么会出现这些现象呢,我应该选什么作溶剂好呢?我所做的这个样品已指明能溶于甲醇但却没说是否能溶于乙腈。这里请教各位,先谢谢了!
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

引用回帖:
7楼: Originally posted by cuckoom at 2012-02-27 13:02:09:
我的流动相是乙腈和水(0.2%),你说的流动相是指说乙腈水这个混合物吗,因为我用的乙腈作溶剂也是流动相中的一种啊,不一定是非得要用乙腈水混合物吧,还有这溶剂改变造成峰面积的改变好象也太大了吧

是的,流动相是指乙腈-水。最好能够使用流动相溶解,溶剂效应的问题。
溶剂改变,特别是极性溶剂(氢键作用),会对溶质吸收波长、强度可能产生影响。。所以。。。
守候在风中的宁静。
8楼2012-02-27 13:07:55
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xxyao

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 鼓励新虫应助~ 欢迎常来分析版交流 ^^ 2012-02-27 16:01:23
可以明确地答复您,在流动相及样品浓度不变的情况下,溶剂改变,峰面积会改变的。主要原因是溶剂的极性大小会影响被测量物质的紫外吸收强度。
不知您的被测量物质的最佳紫外吸收波长是多少,建议你可以调整紫外吸收波长来避免溶剂峰的影响。
男孩子害怕黑暗,情有可原;男人害怕光明,罪不可恕。
2楼2012-02-26 21:21:32
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痴夷子皮

版主 (文坛精英)

老痞

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
楼上正解。不同的溶剂,其紫外吸收强度不同,峰面积不同。建议使用流动相作为溶剂,减少溶剂效应。
守候在风中的宁静。
3楼2012-02-26 23:35:48
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zzghy

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
soundhorizo(金币+1): 欢迎常来分析版指导交流 ^^ 2012-02-27 16:01:47
在选好正确的紫外吸收波长后,在波长210或190以下,甲醇乙腈是不会有吸收的,溶剂是不会出峰的。
溶解样品首选流动相
5楼2012-02-27 12:33:57
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