24小时热门版块排行榜    

查看: 1191  |  回复: 2
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

蓝溪溪

新虫 (初入文坛)

[求助] 提取细胞毒RNA后,电泳后什么也没有 已有2人参与

大家好,小妹我是提取RNA 的新手,这几天从细胞毒中提取RNA ,电泳后总是什么也没有,好像一块空白胶,下面我把提取的步骤发上来,求助各位帮忙看一下。
我的细胞毒一开始是存在-20度,后来我在试验台上室温分装了一次,然后就又保存在-20了。
1、在1.5ml的eppendorf管中加入病毒原液500ul,再加入TRIzol LS500ul,充分混匀,室温放置10min;
2、加入200ul的氯仿,盖紧离心管盖,用力震荡离心管(溶液充分乳化,成乳白状,无分相现象),室温放置10min(由于氯仿沸点低、易挥发,振荡时离心管可能爆开,小心);
3、4℃,12000r/min离心15min,取上层液相移入另一管(切忌吸动白色中间相);
4、加入等体积异丙醇,轻轻颠倒离心管充分混匀液体,室温放置10min;
5、4℃,12000r/min离心15min用枪小心吸去所有上清;
6、1ml75%乙醇洗一遍,4℃,8000r/min离心10min用枪小心吸去所有上清,在超净台中干燥5min;
7、加入适量DEPC处理水。(
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cry_2013

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-24 10:20:26
我们用Trizol提RNA的时候,加入Trizol就强烈震荡5min,再静置5min,后面洗涤的酒精是用DEPC水配置的,其它的步骤大致相同,不知道这两步对试验有没有实质的影响。。。因为我提完RNA后很少跑电泳,直接反转录成cDNA做下面的试验了,感觉病毒RNA提取不会太难,提取过程中腰戴手套,口罩,尽量避免RNA酶的污染,还有一种可能是电泳没条带不一定一点RNA都没有。。。
3楼2018-11-23 16:14:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 3 个回答

cxkhhh

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


drwhoknowss: 金币+1, 鼓励交流 2018-11-24 10:20:19
一般使用试剂盒提取RNA,不会没有电泳的,用biog提取,其实效果还是不错的,不知道你这是什么情况。
2楼2018-11-23 14:04:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 cHIDTWCTtLlG 2026-08-19 3/150 2026-08-19 15:28 by rHxJfXUaiknj
[基金申请] 今天放榜吗? +12 布布和一二 2026-08-19 13/650 2026-08-19 14:33 by 陈晨晨陈啊
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +8 kkkl_v 2026-08-19 8/400 2026-08-19 12:34 by Vivilian
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +52 医学老男孩 2026-08-13 115/5750 2026-08-19 12:09 by 医学老男孩
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +10 基诺咪客 2026-08-17 14/700 2026-08-19 10:34 by 基诺咪客
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +8 启萌科技 2026-08-12 30/1500 2026-08-19 10:22 by 启萌科技
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 什么时候开奖? +6 CrisMessi 2026-08-18 6/300 2026-08-19 08:06 by Equinoxhua
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +4 Tide man 2026-08-12 5/250 2026-08-19 07:41 by 201120518022
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜? +13 Ldrop2023 2026-08-13 16/800 2026-08-18 12:25 by 淀粉搬运工
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +8 wangze12014 2026-08-14 10/500 2026-08-17 17:05 by xter9665
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
信息提示
请填处理意见