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绿茶珍

金虫 (小有名气)

[求助] 膜蛋白的分离纯化问题

最近在开始做真菌细胞色素P450酶的分离纯化,这是一种膜结合蛋白酶,刚开始着手做就遇到了一些问题,希望前辈们帮忙解答一下:
1.文献上的膜蛋白的提取都涉及差速离心,我们实验室没有超高速离心机(100000rpm),能有别的办法解决这一问题吗
2.CO示差检测法测酶含量么有吸收峰,是提取过程酶失活还是么有提取出来,还是杂蛋白太多
3.用加一些去垢剂溶解蛋白吗

多谢多谢,谢谢前辈们了!!
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ying00017

新虫 (小有名气)

现在才看到帖子。很不幸的我也是做P450,不过是植物的。我超高速离心后用差光谱测其含量,同样也出现没有450NM处的特征吸收峰。不知道楼主现在做的怎样,隔了一年了应该有结果吧。希望能传授经验啊,感激不尽!
2楼2013-05-29 09:48:31
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