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rsgd1990银虫 (初入文坛)
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[交流]
关于Ni-NTA纯化蛋白 已有7人参与
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我在实验室纯化一个蛋白，超声波破碎菌体后离心，将上清液过柱子，bindbuffer 的咪唑为10mM,wash buffer 的咪唑为20mM和100mM,elutebuffer 的咪唑为250mM，ph都是8。最后蛋白没有洗下来，还在柱子上。 于是我加大elutebuffer的咪唑浓度，变为400mM,结果还是洗不下来。 老师就让我降低ph试试，今天我把ph调到6.5，但还是不行，明天打算降到5.5试试。 各位有没有遇到这种情况的？是不是ph的原因啊？ |
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