24小时热门版块排行榜    

查看: 7499  |  回复: 15
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌超声破碎参数,求解!!!

各位虫友,小弟刚刚学做纯化蛋白。诱导表达后在超声破碎,总是无活性不溶性的蛋白,师兄说应该是破碎出了问题。看到大家谈破碎功率啊,探头啊,参数啊什么的,无一定论,各有各的高招。迷茫了。想具体问一下破碎1ml(可溶性表达检测)和30ml(大规模诱导纯化)重悬菌液分别选用什么型号探头,什么功率,什么参数比较合适?目前只有一个6号探头,一个6号探头是否都可以应付?谢谢
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
silicare(金币+3, BioEPI+1): 谢谢参与 2012-02-16 12:51:49
不同的变幅杆可适用于不同量的重悬液,所以只有一个变幅杆肯定不能解决问题(1ml和30ml),超声破碎掌握一个基本的原则就是每次超声保证菌液不过热就可以。下面是一家超声破碎仪变幅杆的参数(仅供参考,非广告贴)http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102081/Q1202165.htm

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2012-02-16 10:39:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

joyjane88

铜虫 (初入文坛)

刚刚又看网上有说可以根据成熟的破碎条件的参数换算不同体积/功率/工作时间/破碎次数的参数:(工作时间*功率*破碎次数)/菌液体积=N(定值)。照这个方法是不是基本可行呢?望指点
2楼2012-02-15 09:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxd429

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
看天(金币+3): 鼓励回答 2012-02-15 17:40:43
大肠杆菌表达的过程中由于有可能形成包涵体,所以可能表达的蛋白无活性。你可以在这方面考虑一下,不一定是破碎的问题。
充电
3楼2012-02-15 16:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wind20020108

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
6号探头破碎50毫升没问题的,可以设置3秒 3秒 20分钟,我个人感觉蛋白不溶和超声没问题吧,另外 我也用6号探头超过3毫升,没问题。注意蛋白冷却即可

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

不知道能说啥
5楼2012-02-16 21:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 Qj98d49dHFb9 2026-08-25 5/250 2026-08-26 04:57 by cNXvBfCpiZOM
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 7K1CJE38xLG4 2026-08-25 4/200 2026-08-26 02:04 by cNXvBfCpiZOM
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +18 angus9576 2026-08-25 22/1100 2026-08-26 00:41 by merchancy
[基金申请] 在坚冰还盖着北海的时候,我看到了怒放的梅花。 (金币+10) +6 ziyangfang 2026-08-25 9/450 2026-08-25 20:26 by huagongfeihu
[基金申请] 有没有大神帮我看看基金代码 28+4 1234567wang 2026-08-24 10/500 2026-08-25 19:15 by lfy8008
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +20 羊腰板 2026-08-21 23/1150 2026-08-25 16:34 by zsna
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 22/1100 2026-08-25 15:36 by 医学老男孩
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
[基金申请] 人气不行了 +11 fansofjerry 2026-08-21 11/550 2026-08-25 11:04 by 孤独的英雄6
[教师之家] 导师吐槽:我怎么摊上了这么个极品研究生! +3 苏东坡二世 2026-08-23 3/150 2026-08-25 10:35 by shisan1313
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +17 kkkl_v 2026-08-19 18/900 2026-08-25 09:41 by windflowerwy
[基金申请] 我面上完蛋了 +13 且听虎啸 2026-08-20 14/700 2026-08-25 09:10 by mrkang
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +25 yaoyewhu2008 2026-08-20 27/1350 2026-08-25 08:01 by Equinoxhua
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +14 ziyangfang 2026-08-19 17/850 2026-08-24 18:37 by 哈哈蛤?
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 今天放榜吗? +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
信息提示
请填处理意见