应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 大肠杆菌超声破碎参数，求解！！！
51/1返回列表
查看: 7678  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] 大肠杆菌超声破碎参数，求解！！！

各位虫友，小弟刚刚学做纯化蛋白。诱导表达后在超声破碎，总是无活性不溶性的蛋白，师兄说应该是破碎出了问题。看到大家谈破碎功率啊，探头啊，参数啊什么的，无一定论，各有各的高招。迷茫了。想具体问一下破碎1ml（可溶性表达检测）和30ml（大规模诱导纯化）重悬菌液分别选用什么型号探头，什么功率，什么参数比较合适？目前只有一个6号探头，一个6号探头是否都可以应付？谢谢
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质表达

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-15 09:33:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxd429

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
看天(金币+3): 鼓励回答 2012-02-15 17:40:43
大肠杆菌表达的过程中由于有可能形成包涵体，所以可能表达的蛋白无活性。你可以在这方面考虑一下，不一定是破碎的问题。
赞一下 回复此楼
充电
3楼2012-02-15 16:52:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

joyjane88

铜虫 (初入文坛)
刚刚又看网上有说可以根据成熟的破碎条件的参数换算不同体积/功率/工作时间/破碎次数的参数：（工作时间*功率*破碎次数）/菌液体积=N(定值)。照这个方法是不是基本可行呢？望指点
赞一下 回复此楼
2楼2012-02-15 09:57:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alarace

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
silicare(金币+3, BioEPI+1): 谢谢参与 2012-02-16 12:51:49
不同的变幅杆可适用于不同量的重悬液，所以只有一个变幅杆肯定不能解决问题（1ml和30ml），超声破碎掌握一个基本的原则就是每次超声保证菌液不过热就可以。下面是一家超声破碎仪变幅杆的参数（仅供参考，非广告贴）http://www.instrument.com.cn/netshow/SH102081/Q1202165.htm
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

joyjane88
4楼2012-02-16 10:39:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wind20020108

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
6号探头破碎50毫升没问题的，可以设置3秒 3秒 20分钟，我个人感觉蛋白不溶和超声没问题吧，另外 我也用6号探头超过3毫升，没问题。注意蛋白冷却即可
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

joyjane88
不知道能说啥
5楼2012-02-16 21:24:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] OpenAI又攻克数学难题了，离AI做有机合成还有多远？ +4 wangyl_123 2026-10-10 8/400 2026-10-12 18:09 by wangyl_123
[硕博家园] 极限拉扯，如何抉择 +5 Isak0320 2026-10-12 7/350 2026-10-12 18:03 by 有人要害朕
[教师之家] 课题组会帮你通过考核么？ +3 好运来～9527 2026-10-10 6/300 2026-10-12 14:55 by 简单化xn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:34 by XQNyDCa1Tk5n
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 22:26 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:15 by XQNyDCa1Tk5n
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 22:11 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 9/450 2026-10-11 22:06 by XQNyDCa1Tk5n
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 (EPI+-1)(金币-50) +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 10/500 2026-10-11 14:25 by VOMexwnDzOFZ
[教师之家] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 14:05 by VOMexwnDzOFZ
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:51 by VOMexwnDzOFZ
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 8/400 2026-10-11 13:45 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:54 by VOMexwnDzOFZ
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 7/350 2026-10-11 10:34 by VOMexwnDzOFZ
[考博] 招收博士生一名 +3 mandolin 2026-10-10 3/150 2026-10-11 10:21 by 不是山谷！
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 qR2AdCWTVtkw 2026-10-09 4/200 2026-10-11 03:14 by M0zrYVSAnxpE
[有机交流] 各位大佬，路线设计求助 +6 zapen 2026-10-08 8/400 2026-10-10 15:59 by zapen
[基金申请] 入职后第一次管课题组的专利缴费，对账才发现官费比别人多掏了一倍 +5 13108017953 2026-10-08 5/250 2026-10-10 11:15 by wdwd123
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭