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xxtlxx

铁虫 (初入文坛)

MolEPI: 1
应助: 2 (幼儿园)
金币: 18.5
帖子: 3
在线: 3.2小时
虫号: 1327674
注册: 2011-06-21
性别: GG
专业: 病原细菌与放线菌生物学

【答案】应助回帖

小丹木木(金币+5): good！辛苦了！情人节快乐！ 2012-02-14 10:38:51
小丹木木(MolEPI+1): 2012-02-14 10:39:34

没有看懂你的意图，请按以下分类对号入座：
1. 目的只是获取带his-tag的通用表达载体，目前商业化成熟的载体有很多，比如novagen的pet系列。
2. 目的是构建特殊的（不同宿主，特殊标记等等）带his-tag的表达载体，手中有类似pet22b之类的商业化质粒，可以从商业质粒上连mcs带his-tag甚至带promoter,terminator一起构建进你的目标载体。
3. 目的是构建特殊的（不同宿主，特殊标记等等）带his-tag的表达载体，手中无类似pet22b之类的商业化质粒，可以利用pcr方法在引物中带入HIS*6的碱基导入你的载体。
4. 只是要在该载体中表达带his-tag的基因，简单地在pcr扩增基因片段时候在引物中设计进6个his编码碱基，N端C端取决于你的蛋白。