应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 感受态细胞里到底有没有质粒？
81/1返回列表
查看: 5341  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

luba

新虫 (小有名气)

[求助] 感受态细胞里到底有没有质粒？

如题，实验室的感受态细胞是自己做的，我想知道这个细胞里本身有没有质粒。网上看人家说买来的商业化的感受态是不含质粒的，那自己做的呢。如果说它本身有质粒，那我抽出来的就不仅是我想要的质粒了，就是个混合物了吧？那该怎么检测，怎么分离呢？不分的话会影响到后续转染、表达实验吗？
还有，我转化的菌，提出来的质粒有几个浓度特低，除了低拷贝外还有别的什么原因吗？会不会是杂菌？杂菌如碰巧能在含抗生素的培养基上长的话，是不是质粒提出来就很低还是应该和目的菌一样的高？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2012-02-11 21:01:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
wanhscn(金币+2): 鼓励应助～有道理 2012-02-16 14:01:51
感受态细胞一般是不含质粒的，如果怀疑自己的感受态污染的话，可以将制备感受态的菌株、制备好未做转化的感受态细胞在抗性培养基上涂一下，看有没有污染。最好不要用有污染的感受态，若转化菌生长良好而提质粒情况一直不好的话，考虑污染吧。重新制备感受态或买商业化的吧。
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
2楼2012-02-16 13:56:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luba

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by karin at 2012-02-16 13:56:36:
感受态细胞一般是不含质粒的，如果怀疑自己的感受态污染的话，可以将制备感受态的菌株、制备好未做转化的感受态细胞在抗性培养基上涂一下，看有没有污染。最好不要用有污染的感受态，若转化菌生长良好而提质粒情况 ...

谢谢，不过我的意思是感受态细胞里有没有它自然生长情况下自带的质粒？不一定是有抗性的，也就是说有没有可能我这个做完转化的细胞里既含我转进去的抗性质粒，又含普通的无抗性的质粒？您说的“感受态细胞一般是不含质粒的”是指用一般的方法制作感受态细胞可以去除细菌里本来的质粒吗？还是什么别的意思？
赞一下 回复此楼
3楼2012-02-16 14:35:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liuxueshu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是不含的吧，可以把感受态培养一下，看看能不能提到质粒
赞一下 回复此楼
生物的世界！
4楼2012-02-16 15:55:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by luba at 2012-02-16 14:35:23:
谢谢，不过我的意思是感受态细胞里有没有它自然生长情况下自带的质粒？不一定是有抗性的，也就是说有没有可能我这个做完转化的细胞里既含我转进去的抗性质粒，又含普通的无抗性的质粒？您说的“感受态细胞一般是 ...

我认为是不带质粒的，制备感受态的过程不会去除质粒。
赞一下 回复此楼
坚持就是胜利
5楼2012-02-16 16:08:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

斯多格格

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by luba at 2012-02-16 14:35:23:
谢谢，不过我的意思是感受态细胞里有没有它自然生长情况下自带的质粒？不一定是有抗性的，也就是说有没有可能我这个做完转化的细胞里既含我转进去的抗性质粒，又含普通的无抗性的质粒？您说的“感受态细胞一般是 ...

即使你的感受态细胞里有不含抗性的自带质粒，在你做筛选的时候已经作为阴性被排除了，对实验影响不大吧？
赞一下 回复此楼
书自香我何须花
6楼2012-02-16 17:08:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

达菲鸭

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
luba(金币+5): ★★★★★最佳答案 2012-02-25 02:04:02
感受态里有质粒也是一种正常现象，你可以培养感受态并提个质粒看看，很快的~
赞一下 回复此楼
7楼2012-02-17 10:02:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

牧羊兰

新虫 (初入文坛)
Lz我也有跟你一样的困惑～不知道你有没有解决呢，可以交流一下，我最近也在做转化
赞一下 回复此楼
8楼2015-06-14 15:24:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 luba 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料工程085601，270求调剂 +23 @ASDF1234 2026-04-08 24/1200 2026-04-09 04:27 by 孙小小12457
[考研] 353求调剂 +8 晴空万里air 2026-04-07 8/400 2026-04-09 00:18 by GouQ
[考研] 求调剂 +15 熊二想上岸 2026-04-04 15/750 2026-04-08 22:52 by 猪会飞
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-02 15/750 2026-04-08 22:40 by 猪会飞
[考研] 求机械专硕297第二批调剂 +3 拾柒12。 2026-04-08 3/150 2026-04-08 22:25 by laoshidan
[考研] 302分求调剂 +4 凡语祈愿 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:03 by 土木硕士招生
[考研] 266求调剂 +18 阳阳哇塞 2026-04-07 18/900 2026-04-08 12:59 by grayjzr
[考研] 材料调剂 +19 一样YWY 2026-04-02 20/1000 2026-04-08 11:02 by 不吃魚的貓
[考研] 305求调剂 +3 77Qi 2026-04-07 3/150 2026-04-07 23:18 by jp9609
[考研] 机械调剂 +3 zzzbcb 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:19 by hemengdong
[考研] 301求调剂 +18 121. 2026-04-04 18/900 2026-04-07 17:49 by 蓝云思雨
[考研] （调剂）一志愿报考哈尔滨工业大学0857资源与环境专业378分考生 +7 狠狠加油 2026-04-05 8/400 2026-04-06 16:52 by momo皓
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +5 崔wj 2026-04-05 5/250 2026-04-06 15:40 by lin-da
[考研] 求调剂 +4 wos666 2026-04-03 5/250 2026-04-06 15:22 by wos666
[考研] 一志愿武汉理工大学080200机械工程308分，求调剂 +4 终不似从前 2026-04-05 4/200 2026-04-06 11:46 by 考研学校招点人
[考研] 材料专硕283求调剂 +17 试试看呗 2026-04-04 18/900 2026-04-06 09:24 by 286640313
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 311求调剂 +11 勇敢的小吴 2026-04-02 11/550 2026-04-03 21:46 by qlm5820
[考研] 071000生物学调剂 +8 知昭蔓 2026-04-02 8/400 2026-04-03 10:36 by macy2011
[考研] 求调剂 +7 Aniyaio 2026-04-02 7/350 2026-04-02 16:42 by zzsw+
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭