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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 【求助/交流】异烟肼的作用
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】异烟肼的作用

做谷氨酸棒杆菌的感受态，试过了好多次但都不太成功。后来看到在转接后的培养基中加入了异烟肼，不知道为何加入异烟肼，异烟肼到底起了什么样的作用.希望得到大家的帮助！
哪位虫虫有比较好的制作的感受态的方法吗？我采用的是电转但效果并不好，现在空质粒还没有转进去。
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1楼 2010-11-03 19:44:45
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shuixian2009

木虫 (知名作家)

优秀版主
★
dhd997(金币+1):谢谢交流。 2010-11-05 10:37:37
hyy2005bne(金币+1): 2010-11-06 19:34:24
异烟肼是一种治疗结核病的药物，作用机制可能是抑制分枝杆菌酸（分支杆菌细胞壁的一种成分）合成。我之前也有做过一点谷氨酸棒状杆菌的电转化实验，可惜没有结果。
你做电转用的是什么质粒？
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告别绝望 告别风中的山谷 哭是一种幸福
2楼2010-11-05 09:32:11
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lijunj

金虫 (小有名气)
hyy2005bne(金币+1): 2010-11-06 19:35:15
hyy2005bne(金币+1): 2011-04-01 17:18:30
有篇论文：
适用于异源DNA高效整合转化的谷氨酸棒杆菌电转化法
你看看
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我是一只小小的鸟儿，希望通过自己早起，有份吃的
3楼2010-11-05 20:34:19
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shuixian2009 at 2010-11-05 09:32:11:
异烟肼是一种治疗结核病的药物，作用机制可能是抑制分枝杆菌酸（分支杆菌细胞壁的一种成分）合成。我之前也有做过一点谷氨酸棒状杆菌的电转化实验，可惜没有结果。
你做电转用的是什么质粒？

呵呵，O(∩_∩)O谢谢。
我现在还没有转进去，是用的大肠/谷棒穿梭的质粒.
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4楼2010-11-06 19:34:11
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by lijunj at 2010-11-05 20:34:19:
有篇论文：
适用于异源DNA高效整合转化的谷氨酸棒杆菌电转化法
你看看

恩，看了那，按照上面的方法做也不知道为什么并没有什么进展~
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5楼2010-11-06 19:35:10
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shuixian2009

木虫 (知名作家)

优秀版主
hyy2005bne(金币+1): 2011-04-01 17:18:42
引用回帖:
Originally posted by hyy2005bne at 2010-11-06 19:34:11:



呵呵，O(∩_∩)O谢谢。
我现在还没有转进去，是用的大肠/谷棒穿梭的质粒.

能告诉我质粒的名称吗？我之前一直在做也没有转进去。异烟肼对谷氨酸棒杆菌的抑制作用很强，有的文献中会用有的没有用。但是甘氨酸和Tween80都有用，国外的文献对于革兰氏阳性菌感受态细胞的制备也没有很统一的制备规范。
我之前做转座子转化，都没结果，很郁闷
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告别绝望 告别风中的山谷 哭是一种幸福
6楼2010-11-07 14:31:59
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shuixian2009

木虫 (知名作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by hyy2005bne at 2010-11-06 19:34:11:



呵呵，O(∩_∩)O谢谢。
我现在还没有转进去，是用的大肠/谷棒穿梭的质粒.

我也想换一种质粒来做，不知道能否告知你的质粒是怎么买到的或是实验室保存的？
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告别绝望 告别风中的山谷 哭是一种幸福
7楼2010-11-07 14:35:45
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shuixian2009

木虫 (知名作家)

优秀版主
引用回帖:
Originally posted by hyy2005bne at 2010-11-06 19:35:10:


恩，看了那，按照上面的方法做也不知道为什么并没有什么进展~

国外的文章我也有参考，但是也没有结果
所以考虑换质粒
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告别绝望 告别风中的山谷 哭是一种幸福
8楼2010-11-07 14:37:29
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hyy2005bne

新虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by shuixian2009 at 2010-11-07 14:37:29:

国外的文章我也有参考，但是也没有结果
所以考虑换质粒

哦。我用的是pXMJ19。那你现在感受态做的怎么样了啊，具体用的是什么方法？我现在准备做一下谷棒的生长曲线，不知道有没有帮助
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yulanyi348738
9楼2010-11-08 18:59:15
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shuixian2009

木虫 (知名作家)

优秀版主
★ ★
dhd997(金币+2):鼓励回帖交流。 2010-11-08 20:51:12
引用回帖:
Originally posted by hyy2005bne at 2010-11-08 18:59:15:


哦。我用的是pXMJ19。那你现在感受态做的怎么样了啊，具体用的是什么方法？我现在准备做一下谷棒的生长曲线，不知道有没有帮助

之前做感受态参照的是这篇文献A heat shock following electroporation induces highly efficient transformation of Corynebacterium glutamicum with xenogeneic plasmid DNA.但是还没有结果。你的质粒pXMJ19是买的吗？
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10楼2010-11-08 20:10:32
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