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普弟

木虫 (正式写手)

[求助] 氨基柱,65%乙腈-35%磷酸二氢钾缓冲盐,基线不稳以及出峰位置后移

氨基柱,65%乙腈-35%磷酸二氢钾缓冲盐,走基线的时候,吸收一直往下降,然后柱压也不稳定,会不会是缓冲盐会析出来呢?

测样品的时候,标准图谱是17分钟出峰,但是我的峰竟然是到40分钟出来,而且基线也一直往下走,是什么原因呢?应该如何解决?

操作的过程是:90%乙腈-10%水过渡到65%乙腈-35%水 走1h,后面再走流动相。

柱压不稳应该有什么原因呢?

希望诸位老师和同学能够多多指点!谢谢!

[ Last edited by 普弟 on 2012-2-8 at 18:19 ]
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muyou

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by nrzhw at 2012-02-08 22:55:46:
缓冲盐浓度有点高了,65%乙腈-35%磷酸二氢钾缓冲盐体系中,缓冲盐的总浓度换算出来是0.0175mol/L,而磷酸二氢钾在乙腈中的溶解度极低,因此原因肯能就是缓冲盐析出来了。
不妨做个预实验,可以试一下在一个烧杯 ...

这个比例和浓度的流动相应该是没有问题的,年前我也用氨基柱流动相恰好也是这个,做了近一个月时间没有出现缓冲盐析出的问题,不过氨基柱特别是新氨基柱不好平衡是真的,我们新买的柱子第一次用也是很久(4-5小时)也不平衡,用过几次以后,流动相每天仍需要平衡1-2小时。建议楼主先换上同比例的乙腈水0.6ml/min平衡一个小时左右,然后重新配流动相,过滤,超声,也是先低流速平衡再调至1ml/min 多平衡一会儿试试。
9楼2012-02-09 09:10:38
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muyou

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
普弟(金币+10): ★★★很有帮助 2012-02-09 09:39:57
xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-09 11:40:32
补充一点,我们也出现过基线下飘的情况,不过看漂移的程度,如果检测波长接近末端吸收基线是不容易完全走平的,在可接受范围内就哦了,这个也和检测器灯的情况有关的;还有柱压也是,小范围的波动也可以接受,波动的太厉害就要考虑脱气是否完全,泵内是否有气泡了。
10楼2012-02-09 09:15:37
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