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shaquila

金虫 (正式写手)

[求助] 安捷伦液相色谱问题求助~~

本人是色谱菜鸟,之前没有碰过hplc,实验室的机器是1200,带一个在线脱气,二元泵,紫外检测,和手动进样,开放给一个单位一起用的,之前有的别的实验室同学来用,他都用用甲醇+水,一直用都没问题,后来用了磷酸盐缓冲液,第二天就发现柱压很高,而且基线也随着甲醇与水的比例变化很大,洗了一两天无果,因为是春节前用的,后来大家都回家过年了。。

节后我来做实验需要用一起,我用5%的水洗了一天,发现柱压下降,但是把甲醇提高后,柱压又上升了很高,要降低流速过渡到纯甲醇保存柱子。

之后这几天我就反复用水和甲醇洗,总是当比例变化后,柱压就上升很多,怀疑是柱子有问题,就打电话给售后,他让我松开purge阀,压力依旧25bar左右,后来换了purge阀滤芯,并把阀卸下来后,依旧25bar,后来按照工程师说的松了damper的出口端,依旧压力20多,并且关闭泵后,压力下降为0,他就怀疑说是damper坏了,他说要让我反冲下mixer和damper,操作比较复杂,担心搞不定,,想让他们来修,给了报价27k(含damper的钱),并且下周五才能来。。



实验可拖不起啊,所以趁他们没来,我想试试看看到底能不能解决,今天我用乙腈和水来洗,发现柱压下降很多,洗了一个早上,但是如果由乙腈调到甲醇就压力依旧上升很高,而且好像有杂质基线偶尔有峰出来,然后我换会乙腈,压力下降并且基线平了,乙腈比例越高,柱压越低



我想请问各位高人,有没有可能是甲醇有问题,但是甲醇是买进口的色谱纯,而且用了很多了,会不会变质了?另外会不会溶剂选择阀前面到溶剂瓶这一段有问题,例如污染了什么的,不然为啥换了甲醇就柱压上升,但是又有问题,我用5ml/min的水冲,压力达到20以上,这是不是说明问题不在甲醇上面,或者后面的管路也有堵塞而甲醇同时也出问题? 还有几个问题,请问如果要反冲damper要怎么操作,仪器的压力感应器是不是放在damper之前,所以工程师就怀疑是damper堵住了?





不好意思,一下打了这么多,因为是新手,很多常识不大懂,谢谢大家了
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shaquila

金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-03 16:18:29:
1、
甲醇+水粘度大于乙腈+水,粘度大,压力高。
水/甲醇=4:6左右,粘度相对较大(粘度好像是1.62),压力相对其他比例要高。乙腈+水,粘度基本不大于1,压力相对较小。

2、
缓冲盐使用后,一定要及时清理, ...

好专业啊,看来还是管道堵住了~~~~
那个家伙在做实验室,我在旁边看他操作,我是无辜的。。。
我再用水+甲醇洗洗看吧,90%的水,洗个一天一夜柱子会不会坏了?
3楼2012-02-03 16:26:24
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shaquila

金虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-03 16:33:44:
柱子没有问题就卸下柱子再冲洗。估计是盐析出的问题,用大比例的水清洗试试吧。

我不知道柱子有没有问题,松了purge阀后压力是不是25就算很高了,基本可以排除是柱子问题?
6楼2012-02-03 16:45:21
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shaquila

金虫 (正式写手)

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5楼: Originally posted by nkhwrb at 2012-02-03 16:44:15:
感觉极有可能是被盐堵了。

谢谢,我也感觉,我的实验也要用磷酸盐缓冲液,以后要多冲一会

另外我的柱子是机子配的c18柱子,4.6*50mm, 只有1.8um,我上网看大家都说好像用5um的比较常用,这个会不会有影响?
7楼2012-02-03 16:47:06
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shaquila

金虫 (正式写手)

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8楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-03 16:50:05:
25bar,很高啊。松了purge,5ml/min应该小于10bar才正常。觉得单向阀内某些配件可能要换了。。。

噢,有个问题,对于压力传感器,理论上只有后端堵了,才会使得压力上升,如果是前端堵住,例如pump堵塞,压力不会上升吧?工程师跟让我排查的时候就是排查后端的阀门,但是如果是pump里面部件坏了,是不是会导致压力上升?因为这个部件damper从安捷伦那边邮寄过来,不是工程师带过来,如果是pump有问题, 那到时候不是没有部件解决不了了。。。。

今天和售后联系,售后说之前的那个工程师根据我给他的排查结果,很肯定的就说是damper坏了,我好担心我排查时候有问题,到时候工程师如果发现不是那个问题,那就T_T了,等工程师要一周时间,伤不起啊~~~
9楼2012-02-03 16:56:49
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金虫 (正式写手)

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10楼: Originally posted by 痴夷子皮 at 2012-02-03 17:04:59:
既然工程师要来,配件应该是工程师带来才合理。。。

工程师来的时候,多问点多学点哦。“久病成良医”

没错,我就等着他来,收我这么多钱,一个小时500的服务费,不知道进入安捷伦有什么条件,我都想去了,哈哈
11楼2012-02-03 17:06:26
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shaquila

金虫 (正式写手)

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21楼: Originally posted by zz831024 at 2012-02-04 20:53:55:
走个梯度看下压力波动好不好,如果小于1%那阻尼器和主动阀阀芯应该是没问题的。
看你的描述,很像是堵了。一段段拆开试吧。压力升高一般不用请工程师上门的。请我上门就可以了,呵呵

压力波动比较大,特别是甲醇和水配比的时候~~
哈哈,如果离得近可以请你上门看看
22楼2012-02-05 11:28:25
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shaquila

金虫 (正式写手)

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15楼: Originally posted by yemingzhu007 at 2012-02-03 20:44:49:
楼上说的没错,送了purge阀,用超纯水5ml/min跑,压力应该小于10bar。把purge阀内的滤芯换了试试,应该没问题的。若换下来的purge阀滤芯变黑了些(本来是白的),还应该检查下泵里的密封圈。
换purge阀滤芯,只 ...

不装purge阀依旧是25bar,purge阀的出口螺丝我都旋了很多次了,好像有点不密封了,非得要用力旋才能封住,我现在不敢再拆了,呵呵
23楼2012-02-05 11:30:22
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shaquila

金虫 (正式写手)

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19楼: Originally posted by 32862500 at 2012-02-04 15:52:18:
根据你的情况建议
1.更换purge白头(纯水purge 5.0ml/min压力应该小于10bar)
2.清洗主动阀阀芯
3.不接色谱柱和检测器,用5%甲醇-95%水溶液(用单向流路)清洗(看看压力如何 正常情况应该压力比较小因为没有色 ...

白头换了,主动阀不敢拆下来,因为阀不是有两个吗,而且貌似很复杂,不敢拆啊。。。
后面我有松了purge阀用不同浓度的甲醇,乙腈,水洗了一个晚上,还是不行,不知道这样是不是算不接柱子?
24楼2012-02-05 11:35:06
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shaquila

金虫 (正式写手)

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20楼: Originally posted by zxcd88 at 2012-02-04 16:18:37:
第一,盐析出来了,用5%的甲醇冲使劲就行了,24小时以上最好!
第二,甲醇-水的粘度本身比乙腈-水要大,而且,最大压力是在甲醇和水50:50左右,你用低浓度甲醇冲过之后,直接换到90%甲醇就好,别用梯度来缓慢过渡 ...

谢谢,5%甲醇冲了有挺长时间,但是甲醇梯度还是依旧上升的很高,不懂什么原因,以前好像不会这样,特别是50%左右浓度
25楼2012-02-05 11:36:17
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