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tjzhb

铁虫 (小有名气)

[交流] 请大家推荐灵敏度高的Taq酶,不需要高保真。 已有5人参与

本人提取复杂样品中的DNA,做为模板做PCR,所以其中包含各种微生物的DNA,有些含量很少,用一般的Taq酶很难扩出来,就算用有些公司推荐的号称“只要有一个或几个分子的含量就可以扩出来的”Taq酶效果也不太好。比如A类DNA占总DNA的10%,B类DNA占总DNA的0.1%,这种情况下用什么酶可以把B也高效的扩增出来?
请大家推荐一下?酶的保真性不要求了。
目前用过的Taq酶有天根的、宝生物的、英骏的等。
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churchill87426

木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
Takara EX的酶用过没?扩增效率蛮高的。
2楼2012-02-02 10:35:13
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tjzhb

铁虫 (小有名气)

用过了,感觉还不如天根的效果好呢?
3楼2012-02-02 10:53:32
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547star

木虫 (著名写手)

单靠一个酶来改善,就像一栋楼只用中间一根柱子支撑一样。
为什么
4楼2012-02-02 13:03:41
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tjzhb

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
: Originally posted by 547star at 2012-02-02 13:03:41:
单靠一个酶来改善,就像一栋楼只用中间一根柱子支撑一样。

哦?能否说详细些?
请不吝赐教。
5楼2012-02-02 16:02:33
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hyhl

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
换换PCR方法,比如用巢式PCR试试看,不一定仅仅看Taq酶。供参考!
6楼2012-02-03 11:46:10
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
目前用过最强悍的是promega的GoTaq®
7楼2012-02-03 15:45:39
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
对于A类DNA占总DNA的10%,B类DNA占总DNA的0.1%,扩增的时候,多加点循环。
两种点样方法:要在胶上看A的结果少点点样1ul;要看B则多点样20ul
真相是最大的奢侈品
8楼2012-02-03 20:07:35
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tjzhb

铁虫 (小有名气)

谢谢各位的建议。
9楼2012-02-06 17:52:09
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