应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 凝血酶失活问题
南方科技大学公共卫生及应急管理学院2026级博士研究生招生报考通知（长期有效）
51/1返回列表
查看: 2617  |  回复: 6
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

498243829

金虫 (初入文坛)

[求助] 凝血酶失活问题

凝血酶最佳失活条件？凝血酶与适配体结合的反应Buffer是怎样的？

[ Last edited by 498243829 on 2012-1-2 at 19:36 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

Aptamer_Biosensor 色度色差

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2012-01-02 19:33:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zjlshsh

新虫 (初入文坛)
凝血酶最佳失活条件是激活后的五大要素
1，保存时间
2，温度
3，ph值
4，蛋白含量
5，钙离子浓度
赞一下 回复此楼
7楼2013-01-06 13:33:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

更深的蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
小丹木木(金币+2): 鼓励应助，还很专业，赞一个! 2012-01-03 11:10:26
498243829(金币+5): ★有帮助 谢谢！ 2012-01-04 15:35:46
加热到一定温度肯定能失活，这个酶不像限制性内切酶，还标明了失活条件。凝血酶与适配体结合，需要适配体形成一定的构象，也就是G四聚体结构，K离子能稳定这种G四聚体结构，所以一般缓冲液中都含有几十mM的K离子。
赞一下(1人) 回复此楼
低调务实！
2楼2012-01-03 10:47:48
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

498243829

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
楼: Originally posted by 更深的蓝 at 2012-01-03 10:47:48:
加热到一定温度肯定能失活，这个酶不像限制性内切酶，还标明了失活条件。凝血酶与适配体结合，需要适配体形成一定的构象，也就是G四聚体结构，K离子能稳定这种G四聚体结构，所以一般缓冲液中都含有几十mM的K离子。

我用过95度10min、20min、30min对实验还是有干扰，这样的条件还不足以让它完全失活吗？还是它失活之后也干扰，假若失活后它聚沉，对DNA链有吸附之类的？
我用的缓冲是20 mmol L T ris HCl,PH7.4
140 mmol /L 的 NaCl, 5 mmol /L KCl, 1 mmol/ L CaCl2 , 1 mmol/ L MgCl2 , 妥当否？实验不顺利，我也不清楚是否缓冲不合适
仁兄想必是这方面的高手，多给点指点吧，在下感激涕淋呀！
赞一下 回复此楼
3楼2012-01-03 22:58:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

更深的蓝

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): good！ 2012-01-04 12:21:10
这个条件应该会使凝血酶完全变性，你做实验的这个浓度的蛋白，变性后应该是不会聚沉的。至于你实验中的干扰，你可以用其它蛋白做个对照，看看是否也有干扰。
赞一下(1人) 回复此楼
低调务实！
4楼2012-01-04 09:17:24
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭