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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

[求助] 苯酚法测总糖

请问苯酚法测总糖,有什么注意的技巧或者事项吗?有什么因素会影响实验的进程或者结果呢?谢谢各位啦

[ 来自科研家族 OMICS家族 ]
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fengyu4500

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缺友情(金币+3): 鼓励新虫应助!欢迎常来农林版! 2011-12-14 17:45:13
缺友情: 回帖置顶 2011-12-14 20:10:54
xiaohaiyu(金币+2): 谢谢您的帮助! 2011-12-16 08:47:53
你选择的是苯酚硫酸测糖,以前我做过用蒽酮硫酸测的,测得时候一定要注意蒽酮硫酸的配制方法,苯酚硫酸法也一样,再就是无论那种方法在水浴时第一要保证水浴温度是不是合适,第二加样品的时候一定要在冰水中加,反应结束要放在冰水中立刻结束反应,并且当放置室温时,比色时要尽快,比色时要防止溶液过冷比色皿外壁出现模糊。我只能想到这些,不知道能不能帮到你,祝你实验愉快。
2楼2011-12-14 16:33:20
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dxxjhl

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
缺友情(金币+3, 农林EPI+1): 不错!授予农林EPI,辛苦! 2011-12-14 20:10:44
xiaohaiyu(金币+3): 谢谢啦 2011-12-16 08:50:56
怎么不把两个方法测可溶性糖一起发帖呢?
    苯酚法测可溶性糖含量比较成熟,方法不再多述!   
    苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,基本不受蛋白质存在的影响,并且产生的颜色稳定160min以上。
    苯酚法需要在沸水浴中提取,所以试验要控制水温达到要求;使用前注意看苯酚是否变红,要是变红就得换新的苯酚;同时苯酚毒性大,作试验时注意戴口罩和手套浓硫酸腐蚀性强,试验过程中注意保护自己以及周边财物。
这个方法应该更加适合你做样品多的测定,不需要想蒽酮法那样急急忙忙的控制样品处理到开始比色的间隔时间!
沉静太久,欲展翅高飞
3楼2011-12-14 17:46:52
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bhj67

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xiaohaiyu(金币+2): 谢谢啦 2011-12-18 22:24:23
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:49:02
缺友情(金币+2): 鼓励交流!欢迎常来农林版! 2011-12-22 10:49:11
一般地说,苯酚应该是无色晶体,被空气氧化后会变成粉红色,我干了几十年,没见过常温下是油状的苯酚。你再查一下苯酚的理化性质看看。是不是试剂有问题,因为我曾经用过国产石油醚里面竟然倒出来苍蝇,买的硫酸竟然没有内盖......。哈哈哈。
做人做事诚信为本!现在不努力,老来做垃圾!
7楼2011-12-18 19:51:33
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syao0117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xiaohaiyu(金币+2): 谢谢啦 2011-12-19 10:37:28
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:49:19
缺友情(金币+2): 很专业的回答,谢谢应助,欢迎常来农林版! 2011-12-22 10:49:34
前几天我刚用这个方法,其实这个方法很简单,我们实验室用的苯酚是分析纯的,存放在棕色瓶里的无色晶体状的,有一种特别刺鼻的气味。取用的时候把试剂瓶的内盖取下,外盖口上不要拧紧,放在水浴中加热,65度就可以融化,然后用移液管吸取配90%的苯酚溶液就行了。配制苯酚的时候要戴口罩手套,还有废液不要乱丢弃,味道很大,由于常温下不溶于水,所以一旦沾到哪里很长时间那味道都去不了。
从明天起,做一个幸福的人。种菜、浇水、周游世界。
9楼2011-12-19 10:15:54
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syao0117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaohaiyu(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢啦 2011-12-20 22:36:28
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:50:07
我做过草莓和苹果的果肉烘干,原来用过牛皮信封,但是糖分太高,都粘在牛皮纸信封上了,后来查了一些方法,具体操作方法是:将新鲜果肉切块,放到烧杯或者培养皿里,105度杀青半小时,之后将烘箱调到70度左右烘干,我大约烘了周左右。还有一种杀青方法我师姐用的是用热蒸汽杀青,其他步骤同上
从明天起,做一个幸福的人。种菜、浇水、周游世界。
12楼2011-12-20 16:52:48
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syao0117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

xiaohaiyu(金币+3): ★★★很有帮助 谢谢啦 2011-12-22 08:34:11
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:50:19
杀青是为了使植物组织中的化学成分不发生转变和消耗。在新鲜植物的样品中仍然有许多酶在进行代谢反应,可能会使植物体内的多糖发生水解或者被多酚氧化酶氧化。105度高温杀青能快速使植物体内的酶类失活,减少其对实验结果的影响。
你用玻璃研钵应该也可以,我用烧杯跟蒸发皿一个是它不太容易粘,还有就是受热面积大,加速烘干的时间。以前我也做过辣椒烘干,用信封装的,结果烘了好几周才烘干,做的第一批草莓也是,后来就改用玻璃器皿了。
从明天起,做一个幸福的人。种菜、浇水、周游世界。
15楼2011-12-21 08:46:08
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syao0117

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
缺友情: 回帖置顶 2011-12-22 10:50:34
缺友情(金币+3, 农林EPI+1): 本帖中优秀应助,授予EPI,欢迎常来农林版! 2011-12-22 10:51:05
我想问一下你要测的材料是什么,苯酚硫酸法(该法测得是是可溶性糖,我看你前面说的是总糖,这两个应该不是一个东西吧)是可以用鲜样的,我之所以用干样,是因为我测定的生理指标多,还要测Vc、总酸、Pr,所以没有时间做鲜样,就只能烘干用磨样机磨碎做。
我个人认为鲜样跟干样没啥区别,我师姐做的西红柿的就是用的鲜样做的,不过她用的是蒽酮硫酸法。
有个问题我不理解,你说颜色变深是怎么回事,是你定容完要测定的时候颜色深还是其他?我的草莓烘干的时候颜色也很深,但是没有影响测定。如果你说的是定容完颜色深,你可以把你的样液稀释,我当时是稀释了10倍,你要视情况而定。
从明天起,做一个幸福的人。种菜、浇水、周游世界。
19楼2011-12-22 10:43:03
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bhj67

银虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

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xiaohaiyu(金币+2): 谢谢啦!我买的苯酚说是无色结晶,但是是油状的,而不是粉末状的,会不会影响实验结果呢? 2011-12-16 08:49:59
苯酚需要精致!新鲜的。
做人做事诚信为本!现在不努力,老来做垃圾!
4楼2011-12-14 19:56:19
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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by dxxjhl at 2011-12-14 17:46:52:
怎么不把两个方法测可溶性糖一起发帖呢?
    苯酚法测可溶性糖含量比较成熟,方法不再多述!   
    苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定,方法简单,灵敏度高,基本不受蛋白质存在的影响, ...

我买的苯酚说是无色结晶,但是是油状的,而不是粉末状的,会不会影响实验结果呢?
5楼2011-12-16 08:50:45
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wandou399

银虫 (小有名气)

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★ ★
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缺友情(金币+2): 鼓励应助!欢迎常来农林版! 2011-12-16 09:13:40
xiaohaiyu(金币+1): 谢谢啦,祝你愉快! 2011-12-16 22:06:25
加硫酸时,要飞溅,还有倒入比色皿中时,也要小心,有硫酸啊。
6楼2011-12-16 08:53:50
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bhj67

银虫 (著名写手)

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建议你看一看 高级生化实验技术 这一类书籍!
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8楼2011-12-18 19:54:31
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xiaohaiyu

金虫 (正式写手)

引用回帖:
: Originally posted by bhj67 at 2011-12-18 19:51:33:
一般地说,苯酚应该是无色晶体,被空气氧化后会变成粉红色,我干了几十年,没见过常温下是油状的苯酚。你再查一下苯酚的理化性质看看。是不是试剂有问题,因为我曾经用过国产石油醚里面竟然倒出来苍蝇,买的硫酸竟 ...

请问您做总糖测定的时候,果肉烘干是具体怎么做的?谢谢啦
10楼2011-12-19 10:40:55
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