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gaoyang636

木虫 (著名写手)

MolEPI: 5
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
shangjie111(金币+2): 解释的很详细，非常感谢 2011-12-14 10:12:48
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-12-14 11:06:34

首先，一代测序（Sanger法）现在是仅仅在起终止作用的ddNTP上标记荧光信号，原因是：以ABI的3730为代表的测序仪是以毛细管电泳为技术手段的，同一个模板DNA上机前，进行了PCR，形成了各种长度的片段，最后电泳的时候可以被机器区分判读，最后产出序列信息；
而你说的原理其实就是二代测序的思路，不使用末端终止和电泳了，边合成边测序，每一个碱基加入的时候都有荧光产生，然后机器判断荧光，然后进行下一轮（其实也不尽然，不一定把荧光染料加到dNTP上，可以仅仅利用合成时的能量释放来激发另外的荧光物质(454)，还比如SOLiD--还是ABI，其实是利用的连接反应），想法很好，原理也不难，但是实现起来难度很大，所以直到现在，测序读长还是不能和一代测序相比，错误率也不低；
正在开发中的三代测序就进一步了，（二代抛弃了电泳@_@），抛弃荧光和光学检测系统……这个就不赘言了
anyway，能多想想挺不错的，鼓励一下；以后要不但会想，而且会查阅资料哈