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long杨铜虫 (小有名气)
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[交流]
请帮忙鉴定一下RNA图是怎么回事 已有9人参与
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提取的植物总RNA，1 2 重复 1 最上面的一条带是不是基因组DNA？ 2 如何消除DNA的污染？ 3 RNA提取质量您觉得怎样？ 谢谢 ！  RNA电泳 DL2000 |
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 生物技术 |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3): 热心！ 2011-12-20 20:00:45
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+3): 热心！ 2011-12-20 20:00:45
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1.靠点样孔最上面的是gDNA污染。生工植物RNA kit里没有DNase I 消化的步骤，所以提出来RNA里有DNA污染属于正常现象。而DNA是双链，在量少的情况下也可以染色染得很亮，会让人感觉DNA量很多。 2.有很多公司都有DNase I（RNase free） 这个东西，专门用来消化RNA里的DNA污染。如ambion， Qiagen, omega等。如果你后续实验对这个gDNA敏感则应该去除DNA。不过去DNA的时候要谨慎处理，否则容易造成RNA降解。 3.RNA的质量挺好的（如没有DNA更好），至于28s是否有比18s亮一倍，跟上样量也有关系，并不是所有上样量都能看出很明显的2：1比例。 其实一般跑普通的琼脂糖凝胶电泳也就是使用DNA marker，稍为检测一下，不用那么介意跑RNA电泳必须使用RNA marker。如果不嫌麻烦且要求高一些，可以跑变性胶，甚至使用Agilent（RNA 6000 Nano kit）检测一下RNA的完整性。 |
9楼2011-12-15 11:04:26
joan198108
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