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angelee

新虫 (初入文坛)

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[求助] 求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法已有2人参与

求助！大片段4kb左右基因PCR克隆方法。之前，设计引物以cDNA为模板扩增，结果没有任何条带，究竟是为什么呢？求解答~

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1楼 2011-12-09 21:45:08

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15905170271

新虫 (初入文坛)

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引用回帖:

12楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-07-11 10:46:19
3kd-20kd的DNA片段适用长片段PCR扩增。

长片段PCR不同于一般PCR的特殊要求

1.用Taq-LA DNA聚合酶，该酶是Taq酶或Klentaq 1（无纠错功能）与pfu酶或Deep Vent酶（有纠错功能）的混合物，以Taq酶为主。
2.当需 ...

你好，我是新手克隆基因，老师要我克隆4k的基因，但是是从提RNA开始的，请问我每一步都该注意什么呢？我知道较长基因不好pcr，从提RNA开始应该会更难吧~谢谢你啊~