应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 求助各位大神有米有用过EcoRV限制性内切酶的~~~
111/2返回列表12下一页
查看: 1845  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

芒果布丁

木虫 (小有名气)

[求助] 求助各位大神有米有用过EcoRV限制性内切酶的~~~

RT...
我把目的基因连到T载上，用NdeI和EcoRV双酶切，比目的基因大两三百bp。。。用NdeI单酶切效果是完全一样的。。。用EcoRV单酶切切不出来。。。这是肿么回事啊。。。。求解答。。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
喵星人~
1楼 2011-12-04 18:02:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-04 21:20:10
芒果布丁(金币+1): 2011-12-06 20:31:56
序列上有EcoRV位点么？ps，你仔细看看说明，单酶切和双酶切的buffer和体系都不大一样的，酶活也不同。
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-12-04 21:07:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芒果布丁

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asznpb at 2011-12-04 21:07:32:
序列上有EcoRV位点么？ps，你仔细看看说明，单酶切和双酶切的buffer和体系都不大一样的，酶活也不同。

我的序列上有的，两个酶都可以用Hbuffer的。。。
赞一下 回复此楼
喵星人~
3楼2011-12-06 20:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-12-06 22:53:06
引用回帖:
3楼: Originally posted by 芒果布丁 at 2011-12-06 20:32:30:
我的序列上有的，两个酶都可以用Hbuffer的。。。

那可能是切得时间短了吧，看你的描述应该是慢酶吧，通用buffer双酶切活性降低了，你就慢酶过夜37℃切吧……
赞一下(1人) 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
4楼2011-12-06 21:20:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芒果布丁

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by asznpb at 2011-12-06 21:20:18:
那可能是切得时间短了吧，看你的描述应该是慢酶吧，通用buffer双酶切活性降低了，你就慢酶过夜37℃切吧……

那个，我切过16h的。。。
赞一下 回复此楼
喵星人~
5楼2011-12-07 09:01:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2011-12-07 09:42:22
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

c3024034

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

换其他实验室的酶试试，看是不是酶的问题
赞一下 回复此楼
7楼2011-12-07 18:47:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芒果布丁

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by c3024034 at 2011-12-07 18:47:12:
换其他实验室的酶试试，看是不是酶的问题

用相同的酶切我的表达空载，可以切的开啊。。。
赞一下 回复此楼
喵星人~
8楼2011-12-08 21:21:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芒果布丁

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mengfei8336 at 2011-12-07 09:42:22:
你的两个酶是同一个公司产的吗？确定酶没有问题？酶切2小时和过夜都试一次

都是宝生物的~都试过了，还换过其他公司的还是不行。。。呜呜。。。我换酶切位点算了。。。
赞一下 回复此楼
喵星人~
9楼2011-12-20 13:18:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芒果布丁

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by c3024034 at 2011-12-07 18:47:12:
换其他实验室的酶试试，看是不是酶的问题

都试过了。。。哎。。。换位点好了。。。
赞一下 回复此楼
喵星人~
10楼2011-12-20 13:18:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 芒果布丁 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 00:40 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 8/400 2026-08-22 23:51 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-22 21:54 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 什么时候开奖？ +7 CrisMessi 2026-08-18 8/400 2026-08-22 18:29 by 淀粉搬运工
[基金申请] filecode，4个jtjc了 +13 ziyangfang 2026-08-19 16/800 2026-08-22 17:08 by WH3796
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 今天放榜吗？ +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭