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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 液相梯度出鬼峰
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liyuanyuan7273

金虫 (正式写手)

[交流] 液相梯度出鬼峰 已有8人参与

液相走梯度，基线漂移，出鬼峰，请大家分析一下。液相条件十二烷基硫酸钠磷酸缓冲液和甲醇。
时间（min）            流动相A（%）         流动相B（%）
10                       50                    50
20                       80                    20
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  • 附件 1 : 液相梯度.bmp
    • 2011-12-03 09:46:49, 815.68 K

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1楼 2011-12-03 09:48:03
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xiaodou_xl

至尊木虫 (正式写手)
★ ★
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karl2100(金币+1): 谢谢回帖！ 2011-12-18 00:51:23
如果波长较低的话，尽量避免用梯度洗脱的方法，即便是各方面的人为因素全都抛去了，也很容易产生鬼峰
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6楼2011-12-18 00:30:02
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tamadejkl

银虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
novus(金币+1): 谢谢交流！ 2011-12-05 12:25:49
没有平衡好，多进样平衡一下，还有你用的水是什么水啊，怀疑你的水有问题，
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2楼2011-12-03 13:57:21
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syhorchid

木虫之王 (文学泰斗)
★ ★
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novus(金币+1): 多谢指教！ 2011-12-05 12:25:56
HPLC的“鬼峰” 大部分是溶剂被污染造成的，还有一种原因是进样系统有残留。 先运行一个空白梯度洗脱的方法，从100%水过渡到100%有机溶剂，如果“鬼峰”出现，可以判断是水被污染了（水中有藻类Algae的污染）。如果是使用纯水机制作的水，这种现象是最常见的。如果进样系统有残留，也很容易判断，建议加强或改善洗针程序，延长冲洗Loop的时间。
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syhorchid
3楼2011-12-03 14:59:00
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wyf1230924

铁虫 (初入文坛)
★ ★
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leecius(金币+1): 谢谢帮助。鬼峰大多数情况是由于流动相不干净造成的。 2011-12-14 08:13:22
基线漂移可能和你的检测波长选择有关，十二烷基硫酸钠磷酸缓冲液在这一波长下吸收造成的，可以试着换一下流动相，不一定非要按着标准来做，鬼峰除了上述情况可能造成外，也可能是柱子没洗干净。
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4楼2011-12-13 22:49:30
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