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liyuanyuan7273

金虫 (正式写手)

[交流] 液相梯度出鬼峰 已有8人参与

液相走梯度,基线漂移,出鬼峰,请大家分析一下。液相条件十二烷基硫酸钠磷酸缓冲液和甲醇。
时间(min)            流动相A(%)         流动相B(%)
10                       50                    50
20                       80                    20
30                       80                    20
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  • 附件 1 : 液相梯度.bmp
  • 2011-12-03 09:46:49, 815.68 K

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tamadejkl

银虫 (初入文坛)

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novus(金币+1): 谢谢交流! 2011-12-05 12:25:49
没有平衡好,多进样平衡一下,还有你用的水是什么水啊,怀疑你的水有问题,
2楼2011-12-03 13:57:21
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syhorchid

木虫之王 (文学泰斗)

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novus(金币+1): 多谢指教! 2011-12-05 12:25:56
HPLC的“鬼峰” 大部分是溶剂被污染造成的,还有一种原因是进样系统有残留。 先运行一个空白梯度洗脱的方法,从100%水过渡到100%有机溶剂,如果“鬼峰”出现,可以判断是水被污染了(水中有藻类Algae的污染)。如果是使用纯水机制作的水,这种现象是最常见的。如果进样系统有残留,也很容易判断,建议加强或改善洗针程序,延长冲洗Loop的时间。
syhorchid
3楼2011-12-03 14:59:00
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wyf1230924

铁虫 (初入文坛)

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leecius(金币+1): 谢谢帮助。鬼峰大多数情况是由于流动相不干净造成的。 2011-12-14 08:13:22
基线漂移可能和你的检测波长选择有关,十二烷基硫酸钠磷酸缓冲液在这一波长下吸收造成的,可以试着换一下流动相,不一定非要按着标准来做,鬼峰除了上述情况可能造成外,也可能是柱子没洗干净。
4楼2011-12-13 22:49:30
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herb2009

铜虫 (小有名气)


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鬼峰的面积和位置?
5楼2011-12-13 23:46:23
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xiaodou_xl

至尊木虫 (正式写手)

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karl2100(金币+1): 谢谢回帖! 2011-12-18 00:51:23
如果波长较低的话,尽量避免用梯度洗脱的方法,即便是各方面的人为因素全都抛去了,也很容易产生鬼峰
6楼2011-12-18 00:30:02
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sd80888085636

铁虫 (初入文坛)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-07 12:13:31
出现鬼峰最常见的原因就是流动相脏,尤其是水相脏。

要求使用超纯水,最多两天就应该换一次水。注意:即使使用超纯水净化系统,也要注意经常检查、更换其过滤柱。

实际使用中应根据你实验情况来判断色谱系统的哪一个环节脏了,只是流动相是经常出问题的环节,但并不代表其他部分就没有问题。

你的SDS的保存是否合理,在使用的时候会不会被污染了。直接用的溶剂,还是自己配制的。

[ Last edited by sd80888085636 on 2012-2-1 at 16:36 ]
热忱结交各路同志
7楼2012-02-01 16:34:31
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417316039

银虫 (小有名气)

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xiaoxiao270(金币+1): 3Q 2012-02-07 12:13:36
我走空白的时候也是有很多鬼峰,但是走样品时在同样的地方也有这些乱七八糟的峰,所以也一直没管,感觉是不是甲醇有问题,不同厂家生产的甲醇质量上有区别。
泪可流,辱可忍,脚步不可停!
8楼2012-02-07 10:47:16
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liujiali1990

新虫 (初入文坛)


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我现在也是 经常遇见这种问题,怀疑是滤膜的问题
9楼2012-09-18 16:36:23
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