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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 原生质体制备
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chuanpenglw

新虫 (初入文坛)

[求助] 原生质体制备

我今年研一，要培养真菌，一种霉菌，但是真菌菌丝老是集结在一块、聚集，怎样然菌丝较好的均匀分散在培养基中呢？？、我要得到均匀分散的菌体，然后做原生质体，大家有什么好方法么、？
我现在在培养基中加入豆饼粉，菌体附着在上面，呈均匀的小米粥状，大家有什么好方法么？、
大家有什么好方法啊，谢谢大家
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1楼 2011-12-02 19:03:52
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢热心交流 2011-12-02 23:04:38
那就把你的霉菌菌丝体打碎好了，用加了碎玻璃的摇瓶摇你的霉菌菌丝半个小时左右，就能解决你的问题
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实验一般叫人很纠结..
2楼2011-12-02 22:06:21
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hong_31

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫 2011-12-03 09:00:14
使用豆饼粉的水解液就可以避免上述情况了啊。或者选择其他的真菌菌丝培养基，不要使用含固体原材料的培养基就行了。
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tobeabetterman
3楼2011-12-02 22:09:56
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hong_31

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+7): 谢谢热心交流 2011-12-02 23:04:51
1、马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基：是培养真菌的最主要培养基，其做法是称取200g马铃薯，洗净去皮切成小块，加水1000ml煮沸半个小时，纱布过滤，再加10-20g葡萄糖，充分溶解后定容到1000ml，pH自然，121度灭菌30min。
2、马丁氏培养基：葡萄糖10g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g ，定容至1000ml，pH自然，121度灭菌30min。
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tobeabetterman
4楼2011-12-02 22:19:29
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kingsoo

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

液体培养基里加几颗玻璃珠，它可以打散菌体。
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5楼2011-12-03 07:46:28
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icz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

chuanpenglw(金币+1): 谢谢，很有用 2011-12-03 20:32:26
我做过米曲霉的原生质体制备
你可以选择控制合适的接种浓度、采用液体YPD培养基来获得松散的菌丝体；另外，你可以将菌丝体放在离心管中沉降，选择上层的，即可获得更加松散的菌丝体
当然，你如果选择在平板上覆盖玻璃纸，然后在玻璃纸上面涂布孢子悬浮液，亦可获得松散的菌丝体；
最后，你可以采用高渗透压的方式，高浓度蔗糖培养基，那样也不利于菌丝体集结，但菌丝体有点变态。
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今生的追求大于我的生命!
6楼2011-12-03 17:24:15
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whl6673

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

真菌用菌丝怎么行啊？用其分生孢子试试
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7楼2011-12-03 18:10:16
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俊俊思密达

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by icz at 2011-12-03 17:24:15
我做过米曲霉的原生质体制备
你可以选择控制合适的接种浓度、采用液体YPD培养基来获得松散的菌丝体；另外，你可以将菌丝体放在离心管中沉降，选择上层的，即可获得更加松散的菌丝体
当然，你如果选择在平板上覆盖 ...

我试了ypd培养黑曲霉16h，菌量特别多，过滤取一部分酶解，2.5h没有发现原生质体，酶解液中菌丝可见，未减少。不知道是不是菌球偏大「相比于另一株黑曲霉」，还是ypd营养过剩菌丝生长过了？

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8楼2018-04-25 01:15:07
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