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chuanpenglw

新虫 (初入文坛)

[求助] 原生质体制备

我今年研一,要培养真菌,一种霉菌,但是真菌菌丝老是集结在一块、聚集,怎样然菌丝较好的均匀分散在培养基中呢??、我要得到均匀分散的菌体,然后做原生质体,大家有什么好方法么、?
我现在在培养基中加入豆饼粉,菌体附着在上面,呈均匀的小米粥状,大家有什么好方法么?、
大家有什么好方法啊,谢谢大家
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lvxingan1989

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
scelab(金币+2): 谢谢热心交流 2011-12-02 23:04:38
那就把你的霉菌菌丝体打碎好了,用加了碎玻璃的摇瓶摇你的霉菌菌丝半个小时左右,就能解决你的问题
实验一般叫人很纠结..
2楼2011-12-02 22:06:21
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hong_31

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫 2011-12-03 09:00:14
使用豆饼粉的水解液就可以避免上述情况了啊。或者选择其他的真菌菌丝培养基,不要使用含固体原材料的培养基就行了。
tobeabetterman
3楼2011-12-02 22:09:56
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hong_31

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
scelab(金币+7): 谢谢热心交流 2011-12-02 23:04:51
1、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基:是培养真菌的最主要培养基,其做法是称取200g马铃薯,洗净去皮切成小块,加水1000ml煮沸半个小时,纱布过滤,再加10-20g葡萄糖,充分溶解后定容到1000ml,pH自然,121度灭菌30min。
2、马丁氏培养基:葡萄糖10g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g ,定容至1000ml,pH自然,121度灭菌30min。
tobeabetterman
4楼2011-12-02 22:19:29
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kingsoo

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

液体培养基里加几颗玻璃珠,它可以打散菌体。
5楼2011-12-03 07:46:28
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icz

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

chuanpenglw(金币+1): 谢谢,很有用 2011-12-03 20:32:26
我做过米曲霉的原生质体制备
你可以选择控制合适的接种浓度、采用液体YPD培养基来获得松散的菌丝体;另外,你可以将菌丝体放在离心管中沉降,选择上层的,即可获得更加松散的菌丝体
当然,你如果选择在平板上覆盖玻璃纸,然后在玻璃纸上面涂布孢子悬浮液,亦可获得松散的菌丝体;
最后,你可以采用高渗透压的方式,高浓度蔗糖培养基,那样也不利于菌丝体集结,但菌丝体有点变态。
今生的追求大于我的生命!
6楼2011-12-03 17:24:15
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whl6673

金虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

真菌用菌丝怎么行啊?用其分生孢子试试
7楼2011-12-03 18:10:16
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俊俊思密达

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by icz at 2011-12-03 17:24:15
我做过米曲霉的原生质体制备
你可以选择控制合适的接种浓度、采用液体YPD培养基来获得松散的菌丝体;另外,你可以将菌丝体放在离心管中沉降,选择上层的,即可获得更加松散的菌丝体
当然,你如果选择在平板上覆盖 ...

我试了ypd培养黑曲霉16h,菌量特别多,过滤取一部分酶解,2.5h没有发现原生质体,酶解液中菌丝可见,未减少。不知道是不是菌球偏大「相比于另一株黑曲霉」,还是ypd营养过剩菌丝生长过了?

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-04-25 01:15:07
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