应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸
51/1返回列表
查看: 3193  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yanying198

新虫 (小有名气)

[求助] 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸

我有一蛋白结合核酸，试过DNAase,RNAase,也试过高低盐交替冲洗，还试过Hitrap(肝素柱子)效果都不好，现在想用PEI（聚乙烯亚胺）沉淀法，我想问的是我需要买多大聚合度的PEI，分子量大约多少？我的蛋白也是酸性的，是不是一起沉淀下来了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-30 15:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanying198

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48:
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃 ...

多大聚合度的PEI，分子量大约多少？
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-04 20:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yanying198(金币+5): 2011-12-04 17:42:09
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾蛋白和核酸都被去掉了。到了这一步，还有一个问题。就是洗脱下来的蛋白里面还有PEI, 如果现在就用透析的办法降低盐浓度，PEI和蛋白会重新形成沉淀。所以下一步就是用硫酸胺沉淀的办法把蛋白和PEI分开。用低盐buffer重溶沉淀的蛋白,再过亲合柱就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-03 16:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匆匆3016

新虫 (初入文坛)
一般情况下沉淀核酸PEI的使用浓度是多少？
赞一下 回复此楼
go ahead show your wild side
4楼2012-12-15 10:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0700810107

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾 ...

我有一个多糖样品，想去除其中的核酸和蛋白，是不是可以用PEI沉淀一同去除呢？一般要加入多少浓度的PEI呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-03 11:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭