应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸
51/1返回列表
查看: 3569  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yanying198

新虫 (小有名气)

[求助] 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸

我有一蛋白结合核酸，试过DNAase,RNAase,也试过高低盐交替冲洗，还试过Hitrap(肝素柱子)效果都不好，现在想用PEI（聚乙烯亚胺）沉淀法，我想问的是我需要买多大聚合度的PEI，分子量大约多少？我的蛋白也是酸性的，是不是一起沉淀下来了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-30 15:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yanying198(金币+5): 2011-12-04 17:42:09
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾蛋白和核酸都被去掉了。到了这一步，还有一个问题。就是洗脱下来的蛋白里面还有PEI, 如果现在就用透析的办法降低盐浓度，PEI和蛋白会重新形成沉淀。所以下一步就是用硫酸胺沉淀的办法把蛋白和PEI分开。用低盐buffer重溶沉淀的蛋白,再过亲合柱就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-03 16:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanying198

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48:
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃 ...

多大聚合度的PEI，分子量大约多少？
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-04 20:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匆匆3016

新虫 (初入文坛)
一般情况下沉淀核酸PEI的使用浓度是多少？
赞一下 回复此楼
go ahead show your wild side
4楼2012-12-15 10:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0700810107

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾 ...

我有一个多糖样品，想去除其中的核酸和蛋白，是不是可以用PEI沉淀一同去除呢？一般要加入多少浓度的PEI呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-03 11:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanying198 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审，求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] filecode +9 documentary 2026-08-10 9/450 2026-08-11 10:08 by wk7465
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 基金中了 +15 laoda193707 2026-08-06 15/750 2026-08-11 00:11 by jiafei2190
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭