应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸
51/1返回列表
查看: 3563  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

yanying198

新虫 (小有名气)

[求助] 聚乙烯亚胺沉淀去除核酸

我有一蛋白结合核酸，试过DNAase,RNAase,也试过高低盐交替冲洗，还试过Hitrap(肝素柱子)效果都不好，现在想用PEI（聚乙烯亚胺）沉淀法，我想问的是我需要买多大聚合度的PEI，分子量大约多少？我的蛋白也是酸性的，是不是一起沉淀下来了？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-30 15:19:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fxgowen

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

yanying198(金币+5): 2011-12-04 17:42:09
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾蛋白和核酸都被去掉了。到了这一步，还有一个问题。就是洗脱下来的蛋白里面还有PEI, 如果现在就用透析的办法降低盐浓度，PEI和蛋白会重新形成沉淀。所以下一步就是用硫酸胺沉淀的办法把蛋白和PEI分开。用低盐buffer重溶沉淀的蛋白,再过亲合柱就行了。
赞一下 回复此楼
2楼2011-12-03 16:30:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yanying198

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48:
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃 ...

多大聚合度的PEI，分子量大约多少？
赞一下 回复此楼
3楼2011-12-04 20:38:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匆匆3016

新虫 (初入文坛)
一般情况下沉淀核酸PEI的使用浓度是多少？
赞一下 回复此楼
go ahead show your wild side
4楼2012-12-15 10:57:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0700810107

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by fxgowen at 2011-12-03 16:30:48
在细胞破碎的上清中加入，polyethylenimine聚乙烯亚胺（25 kD，Sigma 公司），离心，因为蛋白和核酸是一同被PEI沉淀下来的，然后再用高盐洗脱蛋白质，而DNA和PEI结合很紧密，所以还是在沉淀里面。这样一来，好多垃圾 ...

我有一个多糖样品，想去除其中的核酸和蛋白，是不是可以用PEI沉淀一同去除呢？一般要加入多少浓度的PEI呢？
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-03 11:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yanying198 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] FileCode能看出啥？ +4 要乐观耀哥 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:02 by 天神眷顾
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +14 Lanmanbaby 2026-08-09 22/1100 2026-08-10 14:57 by wwncly
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 8月时间戳变的，举个手。玩一下，释放压力 +11 archvillain 2026-08-04 13/650 2026-08-10 14:41 by seekfind
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +6 家与远方 2026-08-10 9/450 2026-08-10 14:29 by 爱看书的可乐
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +10 yufeiwaner 2026-08-09 10/500 2026-08-10 13:44 by cdutwml
[基金申请] 关于代码变化问题，想知道的进来 +16 且听虎啸 2026-08-07 23/1150 2026-08-10 12:35 by majunge000
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制，评价高的钱多评价低的钱少，但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变，有变的大神么？ +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭