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2140061

铜虫 (小有名气)

[求助] 奇怪的测序事情

前两天,从国外得到了一个质粒,转化到DH2a,然后测序由于片断比较长,只测了两端的长度,没有中间的片断,但是再次测序就老是提不出质粒,摇菌也不长。为什么啊?我就再挑单克隆,希望明天能摇起来啊
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doublehelix

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

2140061(金币+1): 如果送菌的话,公司提不出质粒,就会要求你提供质粒的 2011-11-21 20:46:15
这个可能有多种原因,不过你要测序的话,不用这么麻烦的,直接送测液体菌体不就行了吗,还省你提质粒了
2楼2011-11-21 00:11:10
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凡子1985

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by doublehelix at 2011-11-21 00:11:10:
这个可能有多种原因,不过你要测序的话,不用这么麻烦的,直接送测液体菌体不就行了吗,还省你提质粒了

到那 人也要给你提质粒 这种做法是掩耳盗铃 有些虫子回答问题都不负责任
3楼2011-11-21 02:36:04
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wanhscn

木虫 (职业作家)

哲学@草根

【答案】应助回帖

★
2140061(金币+1): 谢谢阿,你的建议也是有可能的 2011-11-21 20:47:39
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-11-22 18:06:51
怀疑你挑的是杂菌或者污染菌,不知道你们实验室环境怎样!要不重新转化?
真相是最大的奢侈品
4楼2011-11-21 08:58:04
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xingnian0925

金虫 (小有名气)

invitrogen测序要求最好是送一管菌液。。
与未知的相遇,七分欢喜三分孤寂
5楼2011-11-21 08:59:30
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huguangdong

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
2140061(金币+2): 谢谢.是测通过一次,再次测序就摇菌提质粒都不行了 2011-11-21 20:48:20
西瓜(金币+1): 鼓励应助 2011-11-22 18:07:13
听你的意思,是测通过一次,再次测序就摇菌提质粒都不行了??麻烦你把前因后果说清楚,如果是这样,重新转化一次,用一个好点的感受态细胞。
6楼2011-11-21 14:16:16
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doublehelix

木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 凡子1985 at 2011-11-21 02:36:04:
到那 人也要给你提质粒 这种做法是掩耳盗铃 有些虫子回答问题都不负责任

批评的对,呵呵,我是有点担心他提质粒方法有问题
7楼2011-11-22 12:19:03
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