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y342806116

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序序列 基因突变 移码

我现在正在做一个抗血清的实验,现在已从转化的DH5@中的菌液中提取质粒,经PCR验证之后,条带大小与我目的基因大小一致,经双酶切验证之后,条带一样。可后面将质粒送去测序。经blast比对,发现有部分突变,移码丢失。我的片段大小我810bp。我后面要做蛋白表达的。是不是这质粒不能用来做后续的实验。我需不需要从新开始做啊。后面是我的测序结果。求高人指点,很急啊
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brightfuture01

木虫之王 (文坛精英)

我爱打老虎

文献杰出贡献

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流。 2011-11-18 18:31:11
重做克隆吧,如果是点突变的话还能设计引物再突变过来。移码太多的话没洗,重做。
The world is a fine place and worth fighting for. I agree with the second part.
2楼2011-11-18 16:48:23
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y342806116

新虫 (初入文坛)

是不是跟我用的酶有关系啊,我用的是天跟的2×taq pcr materMix,我需要用高保真酶吗
3楼2011-11-18 20:04:22
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