| 查看: 2706 | 回复: 13 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
串联表达的问题
|
||
| 想请教各位高手一个问题。我有两个酶基因需要表达，由于两个基因在染色体上的位置是相邻的，A800bp左右，B为1.1kb左右，A在B的上游，中间只间隔了19bp，并且已经验证了它们处于同一个操纵子，因此考虑将两个基因一起扩增后接入pET-28a，16度表达过夜，电泳检测发现只表达了A基因，为包涵体表达。后来我在B基因前面又插入了一段T7启动子序列，同样条件表达，电泳检测就只表达了B基因。这两个基因我分别接入pET-28a表达的话，均能成功表达，只是A表达多数为包涵体，B为可溶表达。这个问题纠结了我很长时间了，不知道该怎么解释。。还望各位高手帮我分析分析。先拜谢了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急
已经有3人回复
-
售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急
已经有4人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教一下连接与转化问题！
已经有11人回复
- 多个亚基蛋白 ORF串联表达
已经有9人回复
- 请问有谁在做串联表达这块？
已经有3人回复
- 求助：用pXMJ19构建的重组质粒在谷氨酸棒杆菌不表达，应该如何解决？
已经有6人回复
- 100金币求两段英文翻译
已经有1人回复
- 【求助/交流】植物基因工程的诱导型启动子，问题多多！
已经有10人回复
- 【求助/交流】大肠杆菌中蛋白表达量偏低，大家有什么建议？
已经有28人回复
- 【求助/交流】蛋白诱导表达不出目标条带
已经有41人回复
- 【资源】高效液相色谱仪使用遇到的问题
已经有24人回复
xinyaolu
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 2
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 2053.7
- 散金: 12
- 帖子: 80
- 在线: 111.8小时
- 虫号: 867815
- 注册: 2009-10-10
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
9楼2011-11-17 21:11:51
啊Q精神
木虫 (小有名气)
- BioEPI: 5
- 应助: 19 (小学生)
- 金币: 3790.5
- 红花: 1
- 帖子: 288
- 在线: 198.4小时
- 虫号: 1491245
- 注册: 2011-11-14
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
2楼2011-11-17 08:39:54
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:15:42
silicare(金币+5): 鼓励新虫发帖交流 2011-11-17 12:15:42
|
你可以用Novagen的Duet系列载体。 这类载体有两个多克隆位点。你把两个基因分别转入到相应的位点，就可以同时表达这两个蛋白了。 pETDuet-1 is designed for the coexpression of two target genes. The vector encodes two multiple cloning sites (MCS), each of which is preceded by a T7 promoter, lac operator and ribosome binding site (rbs). |
3楼2011-11-17 09:37:46
4楼2011-11-17 10:47:12
