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莎莎乐happy新虫 (小有名气)
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[求助]
植物组织GFP绿色荧光观察
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| 我在做启动子功能分析实验，将启动子连GFP，转拟南芥，想分析转基因拟南芥各个组织中GFP发荧光情况，应用哪种仪器检测呀？用普通的荧光显微镜可以吗？还是用激光共聚焦？还是其他？ |
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 【分子生物】EPI帖 |
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2楼2011-11-15 00:12:13
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4楼2011-11-15 18:26:56
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5楼2011-11-16 08:45:22
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6楼2011-11-16 08:52:28
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7楼2011-11-16 22:49:38
| 很关心这个问题,我最近也需要做这块的实验.但是从看资料上面的,好象很多是用的激光共聚集.以及楼主,你能提供一些GFP给我吗?谢谢,如果可以,请留下你的联系方式或者联系我的,我的邮箱是wangyi19823918@163.com.谢谢你 |
8楼2011-11-16 22:57:25
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9楼2011-11-17 08:55:06
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用激光共聚焦的话不需要特别处理样本，不过你的样本厚度有要求，不能太厚，否则激光的穿透性会受影响。如果你的样本厚度超过10um的话就要现做物力切片，石蜡或者冰冻都行。然后再用这个片子上共聚焦。共聚焦在10um范围内做详细的光学CT，也就是我说的Z轴步进扫描。这个只要是共聚焦都能做，扫描结果用共聚焦配套的软件就能整合成3D图像或动态演示。具体操作要看你是哪个型号的共聚焦了，不过大同小异~ 共聚焦也能做普通的DIC成像，DIC结果与荧光检测结果merge后就能直观显示哪里有GFP了~ |
10楼2011-11-17 09:03:14