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莎莎乐happy

新虫 (小有名气)

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专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 植物组织GFP绿色荧光观察

我在做启动子功能分析实验，将启动子连GFP，转拟南芥，想分析转基因拟南芥各个组织中GFP发荧光情况，应用哪种仪器检测呀？用普通的荧光显微镜可以吗？还是用激光共聚焦？还是其他？

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1楼 2011-11-14 23:02:47

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terry130

木虫 (正式写手)

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专业: 细胞死亡

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
莎莎乐happy(金币+10): 谢谢！ 2011-11-17 16:07:27
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-11-17 18:38:36
西瓜(金币+5, MolEPI+1): Good！ 2011-11-17 18:38:36

引用回帖:

7楼: Originally posted by 莎莎乐happy at 2011-11-16 22:49:38:
想问一下，组织材料需要做处理吗？还是直接就可以观察？

用激光共聚焦的话不需要特别处理样本，不过你的样本厚度有要求，不能太厚，否则激光的穿透性会受影响。如果你的样本厚度超过10um的话就要现做物力切片，石蜡或者冰冻都行。然后再用这个片子上共聚焦。共聚焦在10um范围内做详细的光学CT，也就是我说的Z轴步进扫描。这个只要是共聚焦都能做，扫描结果用共聚焦配套的软件就能整合成3D图像或动态演示。具体操作要看你是哪个型号的共聚焦了，不过大同小异~
共聚焦也能做普通的DIC成像，DIC结果与荧光检测结果merge后就能直观显示哪里有GFP了~